注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱: 人肥胖易感基因T PCR測定試劑盒原理
英文名稱: 詳見說明
產(chǎn)品貨號: BJ-R014652
產(chǎn)品規(guī)格: 50T
產(chǎn)品分類: PCR熒光定量檢測試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
人肥胖易感基因T PCR測定試劑盒原理組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。
小鼠卵泡休止素 英文名稱: Mouse
Follistatin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FST
N-Benzoyl-L-glutamic acid
6094-36-6 中文名:N-苯甲酰-L-谷氨酸 分子式:C12H13NO5 度:98.0%
小鼠瘤病毒18(HPV-18)ELISA試劑盒
Bromhexine 611-75-6 中文名:鹽酸溴己新 分子式:C14H21Br2ClN2
小鼠瘤病毒16(HPV-16)ELISA試劑盒
Brinzolamide 中文名:布林佐胺 分子式:C12H21N3O5S3 度:98.0%
小鼠硫氧化還原蛋白(x)ELISA試劑盒 Febuxostat 中文名:非布索坦 分子式:C16H16N2O3S
小鼠硫氧化還原蛋白(x)ELISAKit Falcarinol 中文名: 分子式:C17H24O
R人參皂苷Rg HPLC≥98% 20mg Humandopamine-β-hydroxylase,DBHELISAKit 人多巴胺-β羥化酶(DBH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
三七素 HPLC≥98% 20mg
ChickenHeatShockProtein20,HSP-20ELISA試劑盒雞熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
齒孔酸; 齒孔菌酸 HPLC≥96.5% 20mg 載玻片細(xì)胞CASPASE-9蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20
馬兜鈴內(nèi)酰胺A HPLC≥98% 20mg
MouseHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISAKit小鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甲基條葉薊素; 澤蘭黃素 HPLC≥98% 20mg 小鼠纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒 ,英文名: FN ELISA Kit
矢車菊黃素 HPLC≥98% 20mg 小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA檢測試劑盒Mouse8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdGELISAKit
96T/48T
鳳仙萜四醇苷K HPLC≥98% 20mg 人黑色素瘤相關(guān)抗原D4(MAGED4/MAGED4B)試劑盒 Human
MAGED4/MAGED4B ELISA Kit
硝基喜樹堿 HPLC≥97% 20mg
RatCyclin-D1ELISAKit大鼠細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
重樓皂苷E HPLC≥95% 20mg 3’末端RNA探針同位素([32P]pCp)連接酶標(biāo)記試劑盒20
重樓皂苷F HPLC≥94% 20mg MouseDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISA試劑盒小鼠脫氫表雄同酯(DHEA-S)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
益母草 Leonurus sibiricus Stachydrine
xy7nochloride 鹽酸水蘇堿 4136-37-2 C7H14NO2.Cl ≥98%
青蒿速cqmisinin20mg/支
光翠雀減 denudatine 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品無味錄霉素A晶型0417-8701檢查
Delphinidin 3-sambubioside chloride飛燕草素-3-桑布雙糖苷度:>98%