參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
犬瘟熱病毒PCR檢測(cè)試劑盒原理 |
英文名稱 |
詳見(jiàn)說(shuō)明 |
貨號(hào) |
BJ-R014632 |
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū);陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISAKit Clorofene 中文名:4-氯-2-芐基苯酚 分子式:C13H11ClO 度:98.0%
小鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒
Fudosteine 中文名:福多斯坦 分子式:C6H13NO3S 度:98.0%
小鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISAKit Clotrimazole 23593-75-1 中文名:克霉唑 分子式:C22H17ClN2
小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒
Fudosteine 中文名:福多斯坦 分子式:C6H13NO3S
小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISAKit Chlorotetracycline 中文名:金霉素 分子式:C22H23ClN2O8
,二羥基苯乙酮 HPLC≥98% 5mg 小鼠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒 ,英文名: PAPP-A ELISA Kit
,二羥基 HPLC≥98% 5mg 小鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousesolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISAkit 96T/48T
,二氫高刺桐春 HPLC≥98% 5mg 人干擾素a-抗體(Ai-IFN-ab)試劑盒 Human Ai-ierferon aibody(Ai-IFN-ab)ELISA
Kit
S,R環(huán)氧基達(dá)馬樹(shù)脂,二醇酮 HPLC≥98% 5mg
RatiactParathormone,i-PTHELISAKit大鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
表千層塔烯二醇 HPLC≥98% 5mg
C.opicalisRFLP基因分析試劑盒20
脫氫赤桐甾醇葡糖苷 HPLC≥98% 5mg
Mouseleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISA試劑盒小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
環(huán)木菠蘿烯,二醇 HPLC≥98% 5mg 小鼠腺苷酸環(huán)化酶10(ADCY10)ELISA試劑盒 ,英文名: ADCY10 ELISA Kit
對(duì)香豆酰氧基熊果酸 HPLC≥98% 5mg 兔糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit
96T/48T
ObetaD吡喃阿洛糖甙,,貝殼杉烯三醇 HPLC≥98% 5mg 牛脂蛋白脂酶(LPL)試劑盒 Bovine lipoprotein lipase,LPL ELISA Kit
ObetaD吡喃阿洛糖甙,貝殼杉烯二醇 HPLC≥98% 5mg 英文名稱HumanBNPELISAKit人腦素(BNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
異鼠李素-3-O-葡萄...
Isorhamnetin-3-O-β-D-Glucoside (≥98%... 5041-82-7 10MG 標(biāo)準(zhǔn)品
大葉藤黃Garcinia xanthochymus 印度黃同,優(yōu)咕噸同 529-61-3 C13H8O4 ≥98% 綠原酸0 450-050
Asagaloside IV黃芪甲苷84687-43-4黃芪甲甙;黃芪皂苷IV20mg/支
Erythromycin
Lactobionate乳糖酸紅霉素標(biāo)準(zhǔn)品3847-29-8200mg
豬屎豆Crotalaria pallida Barpisoflavone A 2-羥基異櫻黃素 101691-27-4 C16H12O6 ≥95%
犬瘟熱病毒PCR檢測(cè)試劑盒原理注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研