注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
類鼻疽伯克霍爾德菌PCR檢測(cè)試劑盒圖片 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號(hào) |
BJ-R014545 |
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
類鼻疽伯克霍爾德菌PCR檢測(cè)試劑盒圖片組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
小鼠緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA試劑盒 Methyl
2,2-dithienylglycolate 26447-85-8 中文名: 分子式:C11H10O3S2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISAKit Methyl
1-[(2'-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]-2-ethoxy-1H-benzimidazole-7-carboxylate 中文名: 分子式:C25H21N3O3 度:98.0%
小鼠緊張素 II (mouse ANG II) 作用: ELISA
規(guī)格: 96T 美國 Phoenix Methyl
(9Z,11E)-13-hydroxyoctadeca-9,11-dienoate 中文名: 分子式:C19H34O3
小鼠緊張素 I (mouse ANG I) 作用: ELISA 規(guī)格:
96T 美國 Phoenix Methyl
(9Z,11E)-13-hydroxyoctadeca-9,11-dienoate 中文名: 分子式:C19H34O3 度:%
小鼠活性腸肽elisa試劑盒 小鼠活性腸肽試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠活性腸肽試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠活性腸肽試劑盒、小鼠活性腸肽elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Methyl 2-ethoxybenzimidazole-7-carboxylate 150058-27-8 中文名: 分子式:C11H12N2O3
DL色氨酸 HPLC≥98% 200mg 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)試劑盒 Human TIMP-3 ELISA Kit
DL纈氨酸 HPLC≥98% 200mg
RatCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit大鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DL亮氨酸 HPLC≥98% 200mg 10%辛基-β-D-硫代葡萄糖苷(Octyl-β-D-thioglucopyranoside)1毫升
DL谷氨酸 HPLC≥98% 200mg
MouseCalfiestinalalkalinephosphatase,CIAPELISA試劑盒小鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
青霉素V鉀 HPLC≥97% 100mg 小鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA 試劑盒
去氫茯苓酸
HPLC≥98% 10mg Rat muscarinic acetylcholine
receptor (M-AChR) ELISA Kit 大鼠毒蕈堿型乙酰膽堿受體(M-AChR)ELISA試劑盒
刺五加苷D HPLC≥98% 20mg
Humanα-galactosidase,αGALELISAKit 人α半乳糖苷酶(αGAL)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
葫蘆素IIA HPLC≥98% 10mg
CLIAKitfor(Mouseai-IgEreceptoraibody)ELISAKit小鼠抗IgE受體抗體規(guī)格:48T/96T
β,β二甲基丙烯酰紫草素 HPLC≥98% 20mg 飲料總?cè)樗岜壬ǘ繖z測(cè)試劑盒20
黃華堿 HPLC≥98% 20mg MouseIerleukin4,IL-4ELISAKit小鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
胰蛋白酶 ypsin 0.1g
可可減Thqobrominq83-67-0HPLC≥99%,20mg/vial
言酸小檗安;小檗安言酸鹽 Berbamine xy7nochloride 6078-17-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
標(biāo)準(zhǔn)品胰島素504-8708效價(jià)測(cè)定
鉤吻堿;綠黃素馨堿;鉤吻素甲;鉤吻堿;胡曼鹼 Gelsemine 509-15-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定