注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格：
|
產(chǎn)品名稱 |
口蹄疫病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) |
|
英文名稱 |
詳見(jiàn)說(shuō)明 |
|
貨號(hào) |
BJ-R014538 |
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；
◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法：
注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū)；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
口蹄疫病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1 英文名稱： vascuiar
endothelial growth factor receptor 1 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫(xiě)： VEGF-R1
Methyl 3-cyclopropyl-3-oxopropionate
32249-35-7 中文名： 分子式：C7H10O3
小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(mouse VEGF-D) 作用： ELISA 規(guī)格：
48T/96T 進(jìn)口分裝 Methyl
4'-bromomethyl biphenyl-2-carboxylate
114772-38-2 中文名： 分子式：C15H13BrO2 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D 英文名稱： vascuiar
endothelial growth factor D 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫(xiě)： VEGF-D
Methyl 3-cyclopropyl-3-oxopropionate
32249-35-7 中文名： 分子式：C7H10O3 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒 Methyl
4'-methylbiphenyl-2-carboxylate 中文名： 分子式：C15H14O2 度：98.0%
小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(mouse VEGF-C) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 Methyl 4'-bromomethyl biphenyl-2-carboxylate 中文名： 分子式：C15H13BrO2
L精氨酸鹽酸鹽 HPLC≥98% 200mg Humanα2-plasmininhititor,α2-PIELISAKit 人α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
L賴氨酸 HPLC≥98% 200mg
CLIAKitfor(MousemammarycarcinomaMarker-CA153)ELISAKit小鼠癌標(biāo)志物-CA153規(guī)格：48T/96T
L賴氨酸鹽酸鹽 HPLC≥98% 200mg 飲料乙酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20
L酪氨酸 HPLC≥99% 200mg Mouseierleukin8,IL-8ELISAKit小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
L亮氨酸（白氨酸） HPLC≥98% 200mg 小鼠血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子-1(PECAM-1/CD31)ELISA試劑盒 ，英文名： PECAM-1/CD31 ELISA Kit
L鳥(niǎo)氨酸鹽酸鹽 HPLC≥98% 20mg 牛乳糖合成酶(LS)ELISA檢測(cè)試劑盒BovineLactoseSyhetase,LSELISAKit 96T/48T
L蘋(píng)果酸 HPLC≥98% 100mg 人ADP-核糖基化因子5(ARF5)試劑盒 Human ARF5 ELISA kit
L羥脯氨酸 HPLC≥98% 100mg 英文名稱MouseIL-1sRⅡELISAkit小鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)規(guī)格：96T/48T
L乳酸 HPLC≥98% 20mg 冰凍切片組織APC蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
L色氨酸 HPLC≥98% 200mg Ratc-JunN-terminalkinases,JNKELISA試劑盒大鼠c-Jun氨基末端激酶(JNK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
依替二 FelodipineimpurityI 200mg
基蓮心減Neferine
Tabersonine 它勃寧 4429-63-4
Levocabastine
xy7nochloride 鹽酸左卡巴斯汀標(biāo)準(zhǔn)品79547-78-7 50mg鹽酸左卡巴斯汀標(biāo)準(zhǔn)品
23-羥基白樺酸;Anemosapoge 85999-40-2 20mg 訂購(gòu)|咨詢