注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。產品僅用于科研
參數規(guī)格:
產品名稱 |
紅薯內源基因PCR檢測試劑盒圖片 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號 |
BJ-R014485 |
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:本產品就是根據保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質控品及陰性質控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
取N個(N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品)PCR反應管,每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
紅薯內源基因PCR檢測試劑盒圖片組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,轉移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質控品和陽性質控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉移至擴增區(qū)。
小鼠增殖細胞核抗原 英文名稱: Proliferating
Cell Nuclear Aigen 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: PCNA
m-Nitrohydrocinnamic acid 中文名: 分子式:C9H9NO4
小鼠早期生長反應因子1 英文名稱: Mouse Early
Growth Response Protein 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: EGR-1
Nandrolone laurate 中文名:月桂酸諾龍 分子式:C30H48O3 度:98.0%
小鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒 Naproxen
22204-53-1 中文名:萘普生 分子式:C14H14O3 度:98.0%
小鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISAKit Lithocholic acid 中文名:石膽酸 分子式:C24H40O3
小鼠載脂蛋白E(mouse APO E) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Methylprednisolone acetate 中文名:甲基潑尼松龍醋酸酯 分子式:C24H32O6
氧化石蒜堿 HPLC≥98% 20mg
Humanmelanoma-associatedaigen,MAGEELISAKit 人黑色素瘤相關抗原(MAGE)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
氧化小檗堿 HPLC≥98% 20mg
CLIAKitfor26SPSMELISAKit大鼠26S蛋白酶體規(guī)格:48T/96T
氧化型谷胱甘肽 HPLC≥98% 20mg 飲料甘素(dulcin)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20
藥根堿 HPLC≥98% 20mg
MouseL-SelectinELISAKit小鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
野百合堿 HPLC≥99% 20mg 小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP3)ELISA試劑盒 ,英文名: IGFBP3 ELISA Kit
野黃芩苷 HPLC≥98% 20mg 兔子白介素1(IL-1)ELISA檢測試劑盒RabbitIerleukin1,IL-1ELISAKit
96T/48T
野黃芩素 HPLC≥98% 20mg 犬肝堿性0酸酶(L-ALP)試劑盒 Canine
Liver Alkaline Phosphatase,L-ALP ELISA Kit
野鷲尾苷 HPLC≥98% 20mg 英文名稱HumanIercellularadhesionmolecular1ELISAKIT人細胞間粘附分子1(ICAM-1)(CD54)ELISAKIT規(guī)格:96T/48T
野菊花內酯 HPLC≥98% 10mg 大量藍藻菌基因組DNA氯化銫萃取試劑盒5
野馬追內酯A HPLC≥95% 20mg RatIerleukin5,IL-5ELISA試劑盒大鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
野黃芩素 Scellarein 分 子 量:286.2400 CAS編號:529-53-3 分子式:C15H10O6 別 名:金黃紫堿;黃岑配基;高黃芩素;野黃芩黃素 【提取來源】形科韓信草(Labiatae)全草。
苦瓜Momordica charantia Momordicoside I
aglycone 苦瓜皂苷I糖苷 81910-41-0 C30H48O3 DL- 兒茶速03295-100
鑒別丹參酮ⅡA磺酸111605-200301常溫,避光20mg
Polyoxyl 2
Stearyl (AS)聚氧硬脂酸酯2標準品9005-00-9 1g
波羅蜜Aocarpus heterophyllus 5-(6-xy7noxybenzofuran-2-yl)-2- (3-metxylb-1-enyl)benzene-1,3-diol 5-(6-羥基-2-本并基)-2-[(1E)-3-甲基-1-丁烯-1-基]-1,3-本二醇 936006-11-0 C19H18O4 ≥96%