注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
副結(jié)核桿菌PCR檢測試劑盒圖片 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號 |
BJ-R014469 |
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
副結(jié)核桿菌PCR檢測試劑盒圖片組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒 Periplocoside N 39946-41-3 中文名: 分子式:C27H44O6
小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISAKit Nicarbazin 中文名:尼卡巴嗪 分子式:C19H18N6O6 度:99.0%
小鼠組織因子(mouse TF) 作用:
ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Methenolone enanthate 303-42-4 中文名:美替諾龍庚酸酯 分子式:C27H42O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠組織因子 英文名稱: tissue
factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫:
TF Daturataturin A 中文名: 分子式:C34H48O10
小鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒 Nevirapine 中文名:奈偉拉平 分子式:C15H14N4O 度:98.0%
烏藥醇 HPLC≥98% 10mg 組蛋白H3-K56(mono/di)甲基化檢測試劑盒10/20等
烏藥醚內(nèi)酯 HPLC≥98% 20mg
MouseAi-glucoprotein210,GP210ELISA試劑盒小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
無梗五加苷B HPLC≥98% 20mg 小鼠乙酰膽堿酯酶(AchE)ELISA試劑盒 ,英文名: AchE ELISA Kit
無水檸檬酸 HPLC≥98% 100mg 小鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA檢測試劑盒Mouseierferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit
96T/48T
吳茱萸堿 HPLC≥98% 20mg 人降鈣素原(PCT)試劑盒 Human Procalcitonin,PCT ELISA Kit
吳茱萸堿 HPLC≥98% 20mg
Ratai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-AbELISAKit大鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
吳茱萸內(nèi)酯 HPLC≥98% 20mg 組蛋白H3-K56乙酰化檢測試劑盒10/20等
吳茱萸新堿 HPLC≥98% 10mg
Mouseai-humanD-PaothenicAcidmAb鼠抗人D-泛酸(PaothenicAcid)單抗0.1ml/0.2ml0.1ml/0.2ml
吳茱萸總堿 HPLC≥98% 20mg 小鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒 ,英文名: AChRab ELISA Kit
五O乙?;?span lang="EN-US">D吡喃葡萄糖 GC≥99% 20mg 小鼠8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA檢測試劑盒Mouse8-isoprostaglandin,8-iso-PGELISAKit 96T/48T
氧化苦參堿 16837-52-8 檢測用對照品 苦參素
狼牙刺Sophora viciifolia 羽扇豆鹼 550-90-3 C15H24N2O ≥97% 輕溴酸檳榔減01686-250
Dimetxylfraxetin白蠟樹素6035-49-0涔皮素; 二甲基白蠟樹亭20mg/支
Cloprostenol
wo7ium錄前列烯醇標(biāo)準(zhǔn)品55028-72-3400mg
紅根草Salvia prionitis 13-Epimanool 13-表邁諾醇 1438-62-6 C20H34O ≥95%