注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱(chēng): 鵝細(xì)小病毒PCR檢測(cè)試劑盒原理
英文名稱(chēng): 詳見(jiàn)說(shuō)明
產(chǎn)品貨號(hào): BJ-R014456
產(chǎn)品規(guī)格: 50T
產(chǎn)品分類(lèi): PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū);陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
鵝細(xì)小病毒PCR檢測(cè)試劑盒原理組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體 1(VEGF-R1) 作用: ELISA 規(guī)格:
48T/96T 進(jìn)口分裝 Otophylloside
B 4'''-O-β-D-cymaropyranoside 171422-85-8 中文名: 分子式:C56H90O19 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 孕甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
內(nèi)皮生長(zhǎng)因子D 英文名稱(chēng): vascuiar
endothelial growth factor D 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): VEGF-D
Otophylloside B 4'''-O-β-D-oleandropyranoside 168001-54-5 中文名: 分子式:C56H90O19 度:97.0% 關(guān)鍵詞: 孕甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C 英文名稱(chēng): vascuiar
endothelial growth factor C 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): VEGF-C
Otophylloside B 4'''-O-β-D-oleandropyranoside 中文名: 分子式:C56H90O19
內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A 英文名稱(chēng): vascuiar
endothelial growth factor A 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): VEGF-A
Otophylloside B 4'''-O-β-D-oleandropyranoside 中文名: 分子式:C56H90O19 度:97.0%
內(nèi)皮生長(zhǎng)因子165 英文名稱(chēng): vascuiar endothelial growth factor 165 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): VEGF165 Otophylloside B 4'''-O-β-D-oleandropyranoside 168001-54-5 中文名: 分子式:C56H90O19
水仙苷 HPLC≥98% 20mg 犬黃體**素(LH)試劑盒 Canine Leinizing Hormone,LH ELISA Kit
水仙環(huán)素 HPLC≥98% 1mg 英文名稱(chēng)HumanNN-T4ELISAKit人新生甲狀腺素(NN-T4)規(guī)格:96T/48T
水楊苷 HPLC≥98% 20mg 化線粒體氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光測(cè)定試劑盒20
水楊酸 HPLC≥98% 20mg
RatIerleukin1,IL-1ELISA試劑盒大鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
水楊酸甲酯 HPLC≥98% 1ml 小鼠音猬因子N端(Shh-N)ELISA試劑盒 ,英文名: Shh-N ELISA Kit
絲石竹皂苷元OBD葡萄糖醛酸甲酯 HPLC≥98% 20mg 小鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseai-endothelialcellaibody,AECAELISAKit
96T/48T
斯皮諾素 HPLC≥98% 20mg 人結(jié)核菌桿(TB)抗體(IgA)試劑盒 Human
tuberculosis(TB)aibody(IgA)ELISA kit
四甲基姜黃素 HPLC≥98% 20mg
Ratai-IgEreceptoraibodyELISAKit大鼠抗IgE受體抗體ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
四氫表小檗堿 HPLC≥98% 20mg 組蛋白H3-K18乙?;瘷z測(cè)試劑盒10/20等
四氫非洲防己堿 HPLC≥98% 20mg MouseangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISA試劑盒小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
洋川芎內(nèi)酯H Senkyunolide H 分 子 量:0.0000 CAS編號(hào):94596-27-7 洋川芎內(nèi)酯H--(Senkyunolide
H)的詳細(xì)信息 【性狀】本品為微黃色油狀物 【藥理性質(zhì)】熔點(diǎn)140~141℃(320Pa)
米仔蘭Aglaia odorata Odorinol 米仔蘭酸減 72755-22-7 C18H24N2O3 印度黃檀苷(5908
含量測(cè)定川續(xù)斷皂苷Ⅵ111685-200802常溫,避光20mg
甲氧基肉桂酸異戊酯標(biāo)準(zhǔn)品71617-10-2 750mg
烏藥 Lindera aggregata (Sims) Kosterm. Higenamine 去甲烏藥堿 5843-65-2 C16H17NO3 ≥98%