注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱	登革熱病毒ⅢⅣ型分型PCR檢測試劑盒說明書
英文名稱	詳見說明
貨號	BJ-R014446

產(chǎn)品運輸：低溫運輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴增；

◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；

◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實驗過程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。

2. 擴增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。

登革熱病毒ⅢⅣ型分型PCR檢測試劑盒說明書組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。

血小板衍化生長因子 -BB(PDGF-BB)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  Peri acid  中文名：周位酸  分子式：C10H9NO3S 

血小板衍化生長因子 -AB(PDGF-AB)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D  Pentagalloylglucose  14937-32-7  中文名：五沒食子酰葡萄糖  分子式：C41H32O26  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

血小板衍化生長因子 -AB(PDGF-AB)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  Peri acid  中文名：周位酸  分子式：C10H9NO3S  度：98.0%

血小板衍化生長因子 -AA(PDGF-AA)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D  Pentagalloylglucose  中文名：五沒食子酰葡萄糖  分子式：C41H32O26 

血小板**素   英文名稱：   Thromboietin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TPO  Perforatumone  中文名：  分子式：C35H52O5  度：%

肉桂醛 HPLC≥98% 20mg 組蛋白H2A-T1290酸化檢測試劑盒10/20等

肉桂酸 HPLC≥98% 20mg MouseAmylinELISA試劑盒小鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

瑞枯靈 HPLC≥98% 20mg 小鼠原激活的蛋白激酶/MAP激酶(Mapk1/Erk2/Mapk/Prkm1)ELISA試劑盒 ，英文名： Mapk1/Erk2/Mapk/Prkm1 ELISA Kit

瑞香素 HPLC≥98% 20mg 小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA檢測試劑盒MouseSolubleClusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISAKit 96T/48T

噻嗪二酮 HPLC≥98% 5mg 人谷氨酸[NMDA]受體亞基ε-2(-2)抗體試劑盒 Human -2 Aibody ELISA Kit

噻嗪二酮苷 HPLC≥98% 5mg RatGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit大鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

賽門苷I HPLC≥98% 20mg ATP酶法冰凍切片動物肌肉組織分型染色試劑盒20

三白草酮 HPLC≥98% 20mg MouseHistamine,HISELISA試劑盒小鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三尖杉堿 HPLC≥98% 20mg 小鼠原肌球調(diào)節(jié)蛋白3(TMOD3)ELISA試劑盒 ，英文名： TMOD3 ELISA Kit

三尖杉寧堿 HPLC≥98% 20mg 猴載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA檢測試劑盒MonkeyapoproteinA1,apo-A1ELISAKit 96T/48T

羊開口 Sheep openings 5g

橙皮速Hqspqrqtin20-33-HPLC≥98%，20mg/vial

補充中 Hederacolchiside A1 106577-39-3 HPLC≥98% 5 mg/支

丹參素67920-52-9wo7ium Danshensu

人參二醇 Panaxadiol 19666-76-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測定