注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱: 腸道病毒PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟
英文名稱: 詳見說明
產(chǎn)品貨號: BJ-R014407
產(chǎn)品規(guī)格: 50T
產(chǎn)品分類: PCR熒光定量檢測試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
腸道病毒PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
魚類白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒 α-Lapachone 中文名: 分子式:C15H14O3 度:98.0%
魚膠原交聯(lián)(PYD)ELISA試劑盒 α-Lapachone 中文名: 分子式:C15H14O3
魚骨鈣素elisa試劑盒 魚骨鈣素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 魚骨鈣素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:魚骨鈣素試劑盒、魚骨鈣素elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
5-Aminouracil 中文名:5-氨基尿嘧啶 分子式:C4H5N3O2 度:98.0%
魚骨鈣素/骨谷酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒 α-Lapachone 4707-33-9 中文名: 分子式:C15H14O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 萘醌; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
魚二(MDA)ELISA試劑盒 α-Spinasterol acetate 4651-46-1 中文名:α-菠甾醇乙酸酯 分子式:C31H50O2 度:96.0% 關(guān)鍵詞: 豆甾烷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
路路通酸 HPLC≥98% 20mg 犬腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒 Canine
brain naiuretic peptide,BNP ELISA Kit
律草酮 HPLC≥98% 10mg 英文名稱HumanInsulin-likegrowthfactorbindingprotein1ELISAKit人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)規(guī)格:96T/48T
綠原酸 HPLC≥98% 20mg 化人體RUNX3基因重組表達(dá)載體(pCMV5-RUNX3)測序引物對2OD
氯化兩面針堿 HPLC≥98% 20mg
RatHydrocoisone,HYDELISA試劑盒大鼠(HYD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氯化矢車菊素 HPLC≥98% 20mg 小鼠整合素αM(ITGαM)ELISA試劑盒 ,英文名: ITGαM ELISA Kit
天竺葵素(氯化花葵素) HPLC≥98% 10mg 內(nèi)(ET)ELISA檢測試劑盒Monkeyendotoxin,ETELISAKit 96T/48T
氯化纈草素 HPLC≥98% 0.1mL 犬內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒 Dog Endothelial niic oxide syhase,eNOS
ELISA Kit
輪環(huán)藤堿 HPLC≥98% 20mg 英文名稱HumanInsulin-likegrowthfactor2,IGF-IIELISAKit人胰島素樣生長因子2(IGF-2)規(guī)格:96T/48T
輪環(huán)藤寧 HPLC≥98% 20mg 化人體RUNX3基因重組表達(dá)載體(pGEFP-RUNX3)10微克
羅丹明B HPLC≥98% 20mg Rathydroxyproline,HypELISA試劑盒大鼠羥脯氨酸(Hyp)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
延齡草苷 Diosgenin glucoside (≥98%,HPLC) 14144-06-0 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品
木賊 Equisetum hyemale 草質(zhì)素 527-95-7 C15H10O7 ≥98% 奧布卡應(yīng)言酸鹽(O0270000
對照品尼美舒利100555-200501含量測定(UV)
Acetaminopxen對乙酰安基酚標(biāo)準(zhǔn)品103-90-2400mg對乙酰安基酚標(biāo)準(zhǔn)品
角葉鞘柄木Toricellia angulata (S,E)-Deca-2,9-diene-4,6-diyne-1,8-diol (S,E)-癸-2,9-二烯-4,6-二炔-1,8-二醇 931114-98-6 C10H10O2 ≥90%