注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
布魯氏菌核酸熒光PCR檢測試劑盒(探針法)圖片 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號 |
BJ-R014397 |
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應管,每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
布魯氏菌核酸熒光PCR檢測試劑盒(探針法)圖片組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。
載脂蛋白D 英文名稱: Human
Apolipoprotein D 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ApoD
Xanthinol nicotinate 中文名:煙酸占替諾 分子式:C19H26N6O6 度:98.0%
載脂蛋白B(ApoB)測定試劑盒(比濁法)
Xanthopurpurin 中文名:1,3-二羥基蒽醌 分子式:C14H8O4 度:97.0%
載脂蛋白A-I(ApoA-I)測定試劑盒(比濁法)
Xanthopurpurin 中文名:1,3-二羥基蒽醌 分子式:C14H8O4
載脂蛋白 E(APO E) 作用:
ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Oxiracetam
62613-82-5 中文名:奧拉西坦 分子式:C6H10N2O3 度:98.0% 關鍵詞:
載脂蛋白 英文名稱: Apolipoprotein 英文縮寫: AI 規(guī)格: 48T/96T Valsartan 137862-53-4 中文名:纈沙坦 分子式:C24H29N5O3 度:99.0% 關鍵詞:
藜蘆胺 HPLC≥98% 10mg 人巨噬細胞移動抑制因子(MIF)試劑盒 Human MIF ELISA Kit
藜蘆醇 HPLC≥98% 20mg
Ratadrenomedullin,ADMELISAKit大鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
藜蘆醛 HPLC≥98% 20mg 載玻片細胞TUBULIN蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20
藜蘆酸 HPLC≥98% 20mg
Mouse50%complemehemolysis,CH50ELISA試劑盒小鼠血清總補體(CH50)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
里奧林 HPLC≥98% 20mg 小鼠脂多糖(LPS)ELISA試劑盒 ,英文名: LPS ELISA Kit
利卡靈B HPLC≥98% 20mg 腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3(AIL-R3)ELISA檢測試劑盒Monkeytumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AIL-R3ELISAKit
96T/48T
利血平 HPLC≥98% 20mg 犬皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)試劑盒 Canine
Coicosterone,CO ELISA Kit
櫟櫻酸 HPLC≥97.5% 20mg 英文名稱HumanProinsulinELISAKit人胰島素原(PI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
栗精胺 HPLC≥98% 5mg 化大鼠腎上腺髓質(zhì)素(AM)基因重組表達載體(pGEFP-AM)測序引物對2OD
連翹苷 HPLC≥98% 20mg Rathiston-H2bELISA試劑盒大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
延胡索甲素 518-69-4 檢測用對照品 無
土木香 Inula helenium L. 異土木香內(nèi)酯 470-17-7 C15 H20 O2 ≥98%
CHAMISSONOLIDE(P0 89-025
對照品奈韋拉平100641-200401含量測定
Demecarium Bromide地美溴銨標準品56-94-0250mg地美溴銨標準品
雷公藤ipterygium wilfordii 3,4-Dimetxoxypxenol 3,4-二甲氧基本酚 2033-89-8 C8H10O3 ≥95%