注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱	中華鱉球狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書
英文名稱	Trionyx Sinensis Spherovirus(TSSV)PCR
貨號(hào)	BJ-R014314

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；

◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

中華鱉球狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

轉(zhuǎn)錄因子AP-1   英文名稱：   anscription Factors AP-1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   AP-1  n-Octylbenzene  中文名：  分子式：C14H22 

轉(zhuǎn)錄因子 AP-1(AP-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Amprolium   137-88-2  中文名：鹽酸氨丙林  分子式：C14H20Cl2N4 

轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白   英文名稱：   Human ansthyretin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   T  Ritonavir  155213-67-5  中文名：利托那韋  分子式：C37H48N6O5S2  度：98.0%   

轉(zhuǎn)基因植物TE基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T                 Ropivacaine   98717-15-8  中文名：鹽酸羅哌卡因  分子式：C17H27ClN2O 

轉(zhuǎn)基因植物Sad1基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T  Rosiglitazone maleate  中文名：馬來酸羅格列酮  分子式：C22H23N3O7S

Nefopam   中文名：鹽酸奈福泮  分子式：C17H20ClNO  度：98.0%  豚鼠白介素6elisa試劑盒   豚鼠白介素6試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豚鼠白介素6試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠白介素6試劑盒、豚鼠白介素6eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Benzenesulfonic acid  中文名：苯磺酸  分子式：C6H6O3S  度：98.0%  豚鼠白三烯B4elisa試劑盒   豚鼠白三烯B4試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豚鼠白三烯B4試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠白三烯B4試劑盒、豚鼠白三烯B4eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Amlodipine  中文名：氨氯地平  分子式：C20H25ClN2O5  度：98.0%  兔子組織多肽抗原elisa試劑盒   兔子組織多肽抗原試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子組織多肽抗原試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子組織多肽抗原試劑盒、兔子組織多肽抗原eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Propranolol   中文名：鹽酸普萘洛爾  分子式：C16H22ClNO2  度：98.0%  人抗α-胞襯蛋白抗體IgGelisa試劑盒   人抗α-胞襯蛋白抗體IgG試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人抗α-胞襯蛋白抗體IgG試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人抗α-胞襯蛋白抗體IgG試劑盒、人抗α-胞襯蛋白抗體IgGeisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

Propafenone   中文名：鹽酸普羅帕酮  分子式：C21H28ClNO3  度：98.0%  豚鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

胸腺五肽 Thymopentin 分 子 量：268.9300 CAS編號(hào)：69558-55-0 分子式：C10H14OSn 別　　名：胸腺**素 TP是從小牛胸腺提取的一種多肽，發(fā)現(xiàn)兩種相似的類型：胸腺**素-I (TP-I)和胸腺**素-II(TP-II)。TP-II為49肽，由13種安基酸組成。TP-I和TP-II的結(jié)構(gòu)差異是TP-II肽鏈上絲1和蘇43改變?yōu)?span lang="EN-US">TP-I的甘1和組43。精32-酪36的五肽在體內(nèi)外均顯示出TP-II的T細(xì)胞分化活性。49個(gè)安基酸中5個(gè)有活性，現(xiàn)已人工合成精賴天胺纈酪5肽，即胸腺噴丁(timopentin)，并用于臨床。

芍藥屬牡丹組 paeonia moan Paeonol 丹皮酚 552-41-0 C9H10O3 煙減(泥古丁(5215

檢查匙羹藤皂苷C111776-200701常溫，避光20mg

甲磺酸多拉司瓊相關(guān)雜質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品25mg

天名精Carpesium abrotanoides Indole-3-carboxylic acid 3-吲哚 771-50-6 C9H7NO2 ≥95%