注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱: 羊血吸蟲PCR檢測試劑盒實驗步驟
英文名稱: Schistosoma
mattheei,PCR
產(chǎn)品貨號: BJ-R014171
產(chǎn)品規(guī)格: 50T
產(chǎn)品分類: PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
羊血吸蟲PCR檢測試劑盒實驗步驟組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。
氧化酶 英文名稱: Human Xahione
oxidase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫:
XOD Androst-5-ene-3β,17β-diol 3,17-diacetate 中文名:雄甾-5-烯-3β,17β-二醇 3,17-二乙酸酯 分子式:C23H34O4 度:98.0%
氧化低密度脂蛋白 英文名稱: oxidized low
density lipoprotein 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: OxLDL
Qingyangshengenin 3-O-β-D-cymaropyranosyl-(1→4)-β-D-digitoxopyranoside 1186628-87-4 中文名: 分子式:C41H58O14
羊孕/孕(PROG)PCR檢測試劑盒 α-Spinasterol
acetate 4651-46-1 中文名:α-菠甾醇乙酸酯 分子式:C31H50O2
羊階段特異性表面抗原-1PCR檢測試劑盒 羊階段特異性表面抗原-1試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 羊階段特異性表面抗原-1試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:PCR檢測試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:羊階段特異性表面抗原-1試劑盒、羊階段特異性表面抗原-1eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Piracetam 中文名:吡拉西坦 分子式:C6H10N2O2 度:98.0%
羊促卵泡素(FSH)PCR檢測試劑盒 Pioglitazone 中文名:鹽酸吡格列酮 分子式:C19H21ClN2O3S 度:98.0%
6-Aminoindazole 6967-12-0 中文名:6-氨基吲唑 分子式:C7H7N3 線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅳ活性測試盒 可見分光光度法 25管/24樣
(R)-(+)-2-Amino-3-methyl-1,1-diphenyl-1-butanol 8
N4-Benzoyl-2'-deoxycytidine 4836-13-9 中文名:N4-苯甲?;?span lang="EN-US">-2'-脫氧胞苷 分子式:C16H17N3O5 內(nèi)皮生長因子受體2 英文名稱: Human
Kinaseinse Domain Receptor/VEGFR2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: KDR
N6-Benzoyl-5'-O-(4,4'-dimethoxytrityl)-2'-deoxyadenosine 64325-78-6 中文名:N6-苯甲?;?span lang="EN-US">-5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-2'-脫氧腺苷 分子式:C38H35N5O6 2型肺泡細(xì)胞表面抗原 英文名稱: Human Krebs
Von den Lungen 6 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: KL-6
N4-Benzoylcytidine 13089-48-0 中文名:N4-苯甲酰胞苷 分子式:C16H17N3O6 特異性透明質(zhì)酸受體Layilin 英文名稱: hyalurona receptor Layilin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Layilin
仙鶴草 Agrimonia pilosa 1g
三七Threeseven1g
Arctinol B
ARCTINOL B 102054-39-7
(R型)人參皂苷Rh220(R)Ginsenoside Rh2
原蘇木素B;Protosappanin 102036-29-3 20mg 訂購|咨詢