注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
禽沙門氏菌PCR檢測試劑盒圖片 |
英文名稱 |
Salmonella gullinarumPCR |
貨號 |
BJ-R014145 |
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
禽沙門氏菌PCR檢測試劑盒圖片組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
小鼠組織纖溶酶原激活劑(mouse t-PA) 作用: ELISA 規(guī)格:
48T/96T 進(jìn)口分裝 Neutral berberine
sulfate 中文名:硫酸黃連素 分子式:C20H20NO8S 度:98.0%
小鼠組織多肽抗原(TPA)PCR檢測試劑盒 Nevirapine 中文名:奈偉拉平 分子式:C15H14N4O
小鼠組織多肽抗原(mouse TPA) 作用: ELISA 規(guī)格:
48T/96T 進(jìn)口分裝
Neritaloside 中文名: 分子式:C32H48O10 度:97.5%
小鼠組織多肽抗原 英文名稱: Tissue
Polypeptide Aigen 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TPA
Ethyl 2-(3-cyano-4-isobutoxyphenyl)-4-methyl-5-thiazolecarboxylate 中文名: 分子式:C18H20N2O3S
小鼠組織蛋白去乙?;?span lang="EN-US">(HD)PCR檢測試劑盒 Nevirapine 129618-40-2 中文名:奈偉拉平 分子式:C15H14N4O 度:98.0%
Coumarin 7 27425-55-4 中文名: 7 分子式:C20H19N3O2 山羊內(nèi)啡肽(EP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Aspartame 22839-47-0 中文名:阿司帕坦 分子式:C14H18N2O5 山羊骨形成蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒 組裝/原裝
Aripiprazole 12
1,6-Anhydro-β-D-glucose
Benzo-15-crown 5-ether 14098-44-3 中文名:苯并-15-冠5-醚 分子式:C14H20O5 綿羊促卵泡** 英文名稱: Follicle Stimulating Hormone 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FSH
喜樹堿 Camptothecine 分 子 量:348.3400 CAS編號:
構(gòu)樹Broussonetia papyrifera Raretin 蕓香每素 13895-92-6 C14H14O5 煤物理性質(zhì)和化學(xué)成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(G1110 h
含量測定奮乃靜100133-200602常溫,避光100mg
Testosterone
Enanthate CIII庚酸睪酮標(biāo)準(zhǔn)品315-37-7 200mg
滇西八角 Illicium merrillianum
2'-O-metxylperlatolic acid 2'-O-甲基配列地衣酸 3