注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱: 勞斯伴隨病毒PCR檢測試劑盒原理
英文名稱: Rous Associated
Virus(RAV)RTPCR
產(chǎn)品貨號: BJ-R014132
產(chǎn)品規(guī)格: 50T
產(chǎn)品分類: PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質控品及陰性質控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
取N個(N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品)PCR反應管,每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
勞斯伴隨病毒PCR檢測試劑盒原理組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,轉移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質控品和陽性質控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉移至擴增區(qū)。
小鼠脂蛋白相關0脂酶PCR檢測試劑盒 小鼠脂蛋白相關0脂酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠脂蛋白相關0脂酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:PCR檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠脂蛋白相關0脂酶試劑盒、小鼠脂蛋白相關0脂酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
Linagliptin 668270-12-0 中文名:利拉利汀 分子式:C25H28N8O2
小鼠脂蛋白相關0脂酶A2(Lp-PL-A2)PCR檢測試劑盒
N-Benzoyl-leucine 17966-67-5 中文名:N-苯甲?;?span lang="EN-US">-亮氨酸 分子式:3
小鼠脂蛋白PCR檢測試劑盒 小鼠脂蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠脂蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:PCR檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠脂蛋白試劑盒、小鼠脂蛋白PCR檢測試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
N-Benzylmaleimide 1631-26-1 中文名:N-芐基馬來 分子式:C11H9NO2
小鼠支原體PCR檢測試劑盒 小鼠支原體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠支原體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:PCR檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠支原體試劑盒、小鼠支原體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
Loroglossin 58139-22-3 中文名: 分子式:C34H46O18
小鼠正常T細胞表達和分泌因子(RAES/CCL5)PCR檢測試劑盒 Naproxen 中文名:萘普生 分子式:C14H14O3 度:98.0%
N-Acetyl-D-tryptophan
Allyl
cinnamate 1866-31-5 中文名:肉桂酸烯丙酯 分子式:C12H12O2 緊張素Ⅱ一型受體抗原 英文名稱: Angiotensin 2 Receptor 1 Aigen 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫:
AT1R
2-Aminofluorene 153-78-6 中文名:2-氨基芴 分子式:C13H11N 抗緊張素‖受體︱型自身抗體 英文名稱: Angiotensin 2 Receptor 1 Aoaibodies 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫:
AT1R-AA
(1R,2S)-1-Amino-2-indanol 136030-00-7 中文名:(1R,2S)-1-氨基-2-茚醇 分子式:C9H11NO 緊張素Ⅰ 英文名稱: AngiotensinⅠ 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫:
ANGⅠ
Amitraz 33089-61-1 中文名:雙甲瞇 分子式:C19H23N3 三(羥甲基)基鹽酸鹽 100g
豨薟Siegesbeckia orientalis
ent-14,16-Epoxy-8-pimarene-3,15-diol Ent-14,16-環(huán)氧基-8-海松烯-3,15-二醇 1188281-98-2 C20H32O3 ≥95%
東莨菪苷Scopolin20mg/支
大魚藤樹Derris robusta (-)-Variabilin
(6aS,11aS)-3,9-二甲氧基-6H-本并并(3,2-c)(1)本并-6a(11aH)-醇 370102-93-5 C17H16O5 安洛酸(5944
中藥對照藥材莪術(溫郁金)121304-200301TLC法鑒別
8-metxoxypsoralen 8-甲氧基補骨脂素花椒度:≥98%