注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
偽牛痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書 |
英文名稱 |
Pseudocowpox Virus(PCPV)PCR |
貨號(hào) |
BJ-R014086 |
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書;陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
偽牛痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
小鼠性結(jié)合球蛋白(mouse SHBG) 作用: ELISA 規(guī)格:
48T/96T 進(jìn)口分裝 Methenolone
acetate 中文名:美替諾龍醋酸酯 分子式:C22H32O3 度:98.0%
小鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)PCR檢測(cè)試劑盒 Methoxydienone 2322-77-2 中文名:沃氏物 分子式:C20H28O2
小鼠新生甲狀腺素PCR檢測(cè)試劑盒 小鼠新生甲狀腺素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠新生甲狀腺素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:PCR檢測(cè)試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠新生甲狀腺素試劑盒、小鼠新生甲狀腺素PCR檢測(cè)試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Methasterone 中文名:甲基屈他雄酮 分子式:C21H34O2 度:98.0%
小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)PCR檢測(cè)試劑盒 Metamizole 中文名:安乃近 分子式:C13H16N3NaO4S 度:98.0%
小鼠心肽PCR檢測(cè)試劑盒 小鼠心肽試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠心肽試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:PCR檢測(cè)試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠心肽試劑盒、小鼠心肽eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Betamethasone 中文名:倍他米松 分子式:C22H29FO5
Methylprednisolone
hemisuccinate 2921-57-5 中文名: 分子式:C26H34O8 人周期素依賴性激酶4(CDK4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human CDK4
(Cyclin Depende Kinase 4) ELISA Kit
Methylprednisolone
acetate 53-36-1 中文名:甲基潑尼松龍醋酸酯 分子式:C24H32O6 人周期素依賴性激酶5(CDK5)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human CDK5
(Cyclin Depende Kinase 5) ELISA Kit
11β,17α-Dihydroxy-6α-methylpregna-1,4-diene-3,20-dione 6870-94-6 中文名: 分子式:C22H30O4 人重組激活基因2elisa試劑盒 人重組激活基因2試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人重組激活基因2試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人重組激活基因2試劑盒、人重組激活基因2
elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Methylprednisolone 83-43-2 中文名:甲基潑尼松龍 分子式:C22H30O5 人重組激活基因1elisa試劑盒 人重組激活基因1試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人重組激活基因1試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人重組激活基因1試劑盒、人重組激活基因1
elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
17-Acetyloxy-6-chloro-1α-chloromethylpregna-4,6-diene-3,20-dione 17183-98-1 中文名:醋酸環(huán)丙氯地孕酮 分子式:C24H30Cl2O4 人重去甲上腺素elisa試劑盒 人重去甲上腺素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人重去甲上腺素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人重去甲上腺素試劑盒、人重去甲上腺素elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
西貝母堿苷(暫行)
Sipeimineglycosides(Provisional) 20mg
苦楝皮隊(duì)照藥材Chinaberrybarkconolmedicine1g
Hispidulin 高車前素 1447-88-7
雪膽素甲
香葉醇;Geraniol 106-24-1 20mg 訂購(gòu)|咨詢