注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱： 彭氏變形菌PCR檢測試劑盒原理

英文名稱:  Proteus penneriPCR
產(chǎn)品貨號： BJ-R014076

產(chǎn)品規(guī)格： 50T

產(chǎn)品分類： PCR檢測試劑盒

產(chǎn)品運輸：低溫運輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴增；

◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；

◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；

◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實驗過程：

一、試劑準備

1. DNA模板

2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。

2. 擴增試劑準備（PCR前準備區(qū)）

取N個（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。

彭氏變形菌PCR檢測試劑盒原理組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。

小鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISAKit     Cefotaxime   64485-93-4  中文名：頭孢噻肟鈉  分子式：C16H17N5NaO7S2 

小鼠細胞周期素D2(Cyclin-D2)PCR檢測試劑盒              Mecobalamin  13422-55-4  中文名：甲鈷胺  分子式：C63H91CoN13O14P 

小鼠細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISAKit     Cefixime  中文名：頭孢克肟  分子式：C16H15N5O7S2  度：98.0%

小鼠細胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子/CD147   英文名稱：   mouse Exacellular Maix Metalloproteinase Inducer /CD147   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   EMMPRIN/CD147  Meclizine   中文名：鹽酸美克洛嗪  分子式：C25H29Cl3N2  度：98.0%

小鼠細胞色素氧化酶（CC0）PCR檢測試劑盒     Mebendazole  中文名：甲苯咪唑  分子式：C16H13N3O3  度：98.0%

Pazufloxacin mesilate  163680-77-1  中文名：甲磺酸帕珠沙星  分子式：C17H19FN2O7S    人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Strontium ranelate  135459-87-9  中文名：雷尼酸鍶  分子式：C12H10N2O8S    人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

N1-Methyl-4-nitrobenzene-1,2-diamine  41939-61-1  中文名：  分子式：C7H9N3O2    人脂多糖/內(nèi)(LPS)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Lapatinib  231277-92-2  中文名：拉帕替尼  分子式：C29H26ClFN4O4S    人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒          

Clopidogrel bisulfate  135046-48-9  中文名：硫酸氫氯吡格雷  分子式：C16H18ClNO6S2    人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

五味子酯甲 Schizandrol A 分 子 量：536.5740 CAS編號：58546-56-8 分子式：C30H32O9 五味子酯甲--(Schizandrol A)的詳細信息 【藥理性質(zhì)】本品具有保肝、降低血清谷丙轉(zhuǎn)安酶作用，可用于慢性肝炎。

五味子Schisandra chinensis (Turcz.) Baill. Schisanlactone E 五內(nèi)脂 136040-43-2 C30H44O4 靈礦石成分分析標準物質(zhì)(G07212

檢查用鹽酸咪唑100167-199202常溫，避光50mg

Glyceryl Distearate甘油二硬脂酸酯標準品1323-83-7 500mg

藍桉Eucalyptus globulus Macrocarpal C 大果桉醛 C 142628-53-3 C28H38O5 ≥96%