注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱： 豬札如病毒札幌病毒PCR檢測試劑盒實驗步驟

英文名稱:  Porcine Sapovirus（PoSaV）（）RTPCR
產(chǎn)品貨號： BJ-R014063

產(chǎn)品規(guī)格： 50T

產(chǎn)品分類： PCR檢測試劑盒

產(chǎn)品運輸：低溫運輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴增；

◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；

◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；

◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實驗過程：

一、試劑準備

1. DNA模板

2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。

2. 擴增試劑準備（PCR前準備區(qū)）

取N個（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。

豬札如病毒札幌病毒PCR檢測試劑盒實驗步驟組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。

小鼠脫氧酚PCR檢測試劑盒   小鼠脫氧酚試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠脫氧酚試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：PCR檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠脫氧酚試劑盒、小鼠脫氧酚eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Loperamide   中文名：鹽酸洛哌丁胺  分子式：C29H34Cl2N2O2  度：98.0%

小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)PCR檢測試劑盒     Loratadine  中文名：氯雷他定  分子式：C22H23ClN2O2 

小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISAKit     Benzenesulfonic acid  1998/11/3  中文名：苯磺酸  分子式：C6H6O3S 

小鼠脫氫酶E1(PDHE1)PCR檢測試劑盒     Chrysophanol 8-O-glucoside  13241-28-6  中文名：  分子式：C21H20O9 

小鼠脫氫酶E1(PDHE1)ELISAKit     Cholesterol  57-88-5  中文名：膽固醇  分子式：C27H46O  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

Pramipexole di  104632-25-9  中文名：鹽酸普拉克索  分子式：C10H19Cl2N3S    CLIAKitforBeta-EP(RabbitBeta-Endorphin)ELISAKit兔子β內(nèi)啡肽規(guī)格：48T/96T

N-6-Methyl-7,7-dioxo-2-sulfamoyl-5,6-dihydro-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-yl]acetamide  147200-03-1  中文名：  分子式：C10H14N2O5S3    樣品二維電泳裂解液用于蛋白二維電泳

1,5-Pentanediol diacrylate  36840-85-4  中文名：  分子式：C11H16O4    RabbitGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit兔糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Atracurium oxalate  64228-78-0  中文名：阿曲庫胺草酸鹽  分子式：C53H68N2O16    豚鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-2 ELISA Kit

Lurasidone  367514-87-2  中文名：魯拉西酮  分子式：C28H36N4O2S    Human ubiquitin decomposition enzyme (DUB) ELISA Kit 人泛素分解酶(DUB)ELISA試劑盒

水牛角粉 Water buffalo hornpowder 1g

5-羥基色安醋5-5-xy7noxyyptophcn26-69-9HPLC≥98%，20mg/vial

常春藤苷C Hederacoside C 14216-03-6 HPLC≥98% 5mg/支

含量測定頭孢呋辛酯130492-2004022-8℃，避光200mg

去氫鉤藤堿;柯諾辛因堿 corynoxeine 1630-94-4;630-94-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定