注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱: 豬嵴病毒庫布病毒PCR檢測試劑盒說明書
英文名稱: Porcine kobuvirus(PKV)()RTPCR
產(chǎn)品貨號: BJ-R014054
產(chǎn)品規(guī)格: 50T
產(chǎn)品分類: PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
豬嵴病毒庫布病毒PCR檢測試劑盒說明書組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。
小鼠特異生長因子PCR檢測試劑盒 小鼠特異生長因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠特異生長因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:PCR檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠特異生長因子試劑盒、小鼠特異生長因子PCR檢測試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 中文名:鹽酸利多卡因 分子式:C14H23ClN2O 度:98.0%
小鼠特異生長因子/相關(guān)因子(TSGF)PCR檢測試劑盒 中文名:利多卡因 分子式:C14H22N2O 度:98.0%
小鼠特異生長因子/相關(guān)因子(TSGF)ELISAKit Benzophenone 119-61-9 中文名:二苯甲酮 分子式:C13H10O
小鼠糖原合成酶激酶PCR檢測試劑盒 小鼠糖原合成酶激酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠糖原合成酶激酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:PCR檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠糖原合成酶激酶試劑盒、小鼠糖原合成酶激酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Bis[4-(dimethylamino)phenyl]methane 中文名:雙[4-(二甲氨基)苯基]甲烷 分子式:C17H22N2 度:98.0%
小鼠糖原合成酶激酶(GSK)PCR檢測試劑盒 Levamisole 16595-80-5 中文名:鹽酸咪唑 分子式:C11H13ClN2S 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
Gemcitabine 95058-81-4 中文名:吉西他濱 分子式:C9H11F2N3O4
CLIAKitforAELISAKit大鼠抗凝血酶受體規(guī)格:48T/96T
Mizolastine 108612-45-9 中文名:咪唑司汀 分子式:C24H25FN6O 線粒體復(fù)合物III蛋白共沉淀分析試劑盒5次
Avanafil 330784-47-9 中文名:阿伐那非 分子式:C23H26ClN7O3
Rabbitai-glycoproteinaibody,GPELISAKit兔抗糖蛋白抗體(GP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Tigecycline 中文名: 分子式:C29H39N5O8 豚鼠白介素1β(IL1B)ELISA試劑盒 ,英文名: IL1B ELISA Kit
Medetomidine 86347-15-1 中文名:鹽酸美托咪啶 分子式:C13H17ClN2 Human ubiquitin conjugating enzyme (E2/UBCE) ELISA Kit 人泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)ELISA試劑盒
水紅木Viburnum cylindricum Vibsanin C 葉含莢寧 C 74690-89-4 C25H36O5 ≥95%
野柏合減Monocrotclinq312--020mg
人參皂苷Rb1;人參皂甙Rb1
Ginsenoside Rb1 41753-43-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
標準品人胰島素140633-200302RP-HPLC法效價測定
扁蓄苷;萹蓄苷 Avicularin 572-30-5 20mg HPLC≥98% 暫無簡介