注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。產(chǎn)品僅用于科研

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱： 耐久腸球菌PCR檢測試劑盒說明書

英文名稱:  Enterococcus duransPCR
產(chǎn)品貨號： BJ-R013586

產(chǎn)品規(guī)格： 50T

產(chǎn)品分類： PCR檢測試劑盒

產(chǎn)品運輸：低溫運輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；

◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；

◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；

◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實驗過程：

一、試劑準備

1. DNA模板

2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

使用方法：

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。

2. 擴增試劑準備（PCR前準備區(qū)）

取N個（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應管，每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。

耐久腸球菌PCR檢測試劑盒說明書組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。

兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISAKit     6-Amino-1-methyl-5-nitrosouracil  6972-78-7  中文名：  分子式：C5H6N4O3 

兔轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISAKit                 5α-Androstanedione  中文名：5α-雄甾烷二酮  分子式：C19H28O2 

兔轉(zhuǎn)化生長因子-β1(rabbit TGF-b1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  4-Chlorodehydromethyltestosterone  中文名：4-氯去氫甲基  分子式：C20H27ClO2  度：98.0%

兔轉(zhuǎn)化生長因子-b2(rabbit TGF-b2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝     4-Chlorodehydromethyltestosterone  中文名：4-氯去氫甲基  分子式：C20H27ClO2 

兔轉(zhuǎn)化生長因子-a(rabbit TGF-a)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  4-Chlorotestosterone acetate  855-19-6  中文名：醋酸氯  分子式：C21H29ClO3

DMEM 4,5g/L Glu,25mM HEPE,w/oL-Gln 500ml  Media   BOT

Gentamicin 50 mg/ml 1 x 10 ml screw cap  Media   BOT

DMEM high glucose w/o Na Pyruvate 500ml  Media   BOT

DMEM 4.5g/L Glucose w/o L-Gln, PR, 500ml  Media   BOT

Pen/Strep/Fungizone 10K/10K/25ug, 20 ml  Media   BOT

人晶狀體蛋白αB(CRYαB)PCR檢測試劑盒 別稱:CRYAB, CMD1II, CRYA2, CTPP2, HSPB5 Human CRYαB(Crystallin Alpha B) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組CRYαB濃度