產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱: 豬瘟病毒疫苗株PCR檢測(cè)試劑盒原理
英文名稱: Classical Swine
Fever VirusVaccine(CSFVVaccine)RTPCR
產(chǎn)品貨號(hào): BJ-R013468
產(chǎn)品規(guī)格: 50T
產(chǎn)品分類: PCR檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū);陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
豬瘟病毒疫苗株PCR檢測(cè)試劑盒原理組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)PCR檢測(cè)試劑盒 2-Methylanthraquinone 中文名:2-甲基蒽醌 分子式:C15H10O2
人軸突生長(zhǎng)誘向因子4PCR檢測(cè)試劑盒 人軸突生長(zhǎng)誘向因子4試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人軸突生長(zhǎng)誘向因子4試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:PCR檢測(cè)試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人軸突生長(zhǎng)誘向因子4試劑盒、人軸突生長(zhǎng)誘向因子4 PCR檢測(cè)試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
2-Methyl-4-(2-methylbenzoylamino)benzoic acid 中文名: 分子式:C16H15NO3 度:98.0%
人軸突生長(zhǎng)誘向因子4(n4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human n4 (Nein 4) ELISA Kit 2-Methoxystypandrone 中文名: 分子式:C14H12O5
人軸突生長(zhǎng)誘向因子1PCR檢測(cè)試劑盒 人軸突生長(zhǎng)誘向因子1試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人軸突生長(zhǎng)誘向因子1試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:PCR檢測(cè)試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人軸突生長(zhǎng)誘向因子1試劑盒、人軸突生長(zhǎng)誘向因子1 PCR檢測(cè)試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
2-Methyl-4-(2-methylbenzoylamino)benzoic acid 中文名: 分子式:C16H15NO3
人軸突生長(zhǎng)誘向因子1(n1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human n1 (Nein 1) ELISA Kit 2-Methoxystypandrone 中文名: 分子式:C14H12O5 度:98.0%
FASTDIGEST
PSPFI 20 rxns 限制性內(nèi)切酶和克隆酶
PCR MASTER MIX
(2X) 200 rxns PCR
PCR MASTER MIX
(2X) 1,000 rxns PCR
TranscriptAid T7
High Yield Transcription Kit 50
rxns 體外轉(zhuǎn)錄
GENEJET PLASMID MIDIPREP KIT 25 rxns DNA純化
人富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61)PCR檢測(cè)試劑盒 別稱:CCN1, GIG1, IGFBP10 Human Cyr61(Cysteine Rich Protein, Angiogenic Inducer 61) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測(cè)Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組Cyr61濃度