注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱: 貝氏貝諾孢子蟲PCR檢測試劑盒實驗步驟
英文名稱: Besnoitia
besnoitiPCR
產(chǎn)品貨號: BJ-R013343
產(chǎn)品規(guī)格: 50T
產(chǎn)品分類: PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
貝氏貝諾孢子蟲PCR檢測試劑盒實驗步驟組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。
大鼠半胱天冬蛋白酶8 英文名稱: active
cysteine-aspaic acid protease-8 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Active Caspase-8 3-Amino-5-mercapto-1,2,4-triazole 中文名:3-氨基-5-巰基-1,2,4-三唑 分子式:C2H4N4S
大鼠半胱天冬蛋白酶7 英文名稱: active
cysteine-aspaic acid protease-7 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Active Caspase-7 3-Amino-5-mercapto-1,2,4-triazole 中文名:3-氨基-5-巰基-1,2,4-三唑 分子式:C2H4N4S 度:98.0%
大鼠半胱天冬蛋白酶3 英文名稱: active
cysteine-aspaic acid protease-3 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Active Caspase-3 3-Amino-5-phenylpyrazole
大鼠白三烯C4PCR檢測試劑盒 大鼠白三烯C4試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 大鼠白三烯C4試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:PCR檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠白三烯C4試劑盒、大鼠白三烯C4
PCR檢測試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Trityl candesartan
139481-72-4 中文名: 分子式:C43H34N6O3
大鼠白三烯B4PCR檢測試劑盒 大鼠白三烯B4試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 大鼠白三烯B4試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:PCR檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠白三烯B4試劑盒、大鼠白三烯B4 PCR檢測試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Trityl candesartan 中文名: 分子式:C43H34N6O3
CFR42I
(SACII) 2,000U (10U/ul) 限制性內(nèi)切酶和克隆酶
CSP6I (CVIQI) 1,500U (10U/ul) 限制性內(nèi)切酶和克隆酶
DRAI 1,500U (10U/ul) 限制性內(nèi)切酶和克隆酶
DRAI, HC 7,500U (50U/ul) 限制性內(nèi)切酶和克隆酶
EAM1104I (EARI) 300U (10U/ul) 限制性內(nèi)切酶和克隆酶
人白介素33(IL-33)PCR檢測試劑盒 別稱:IL33, C9orf26, DVS27, IL1F11, NF-HEV, NFEHEV, Interleukin 33, IL-33 Human IL-33(Interleukin 33) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組IL-33濃度