注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱: 鳥類多瘤病毒PCR檢測試劑盒原理
英文名稱: Avian
Polyomavirus(APV)PCR
產(chǎn)品貨號: BJ-R013296
產(chǎn)品規(guī)格: 50T
產(chǎn)品分類: PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
鳥類多瘤病毒PCR檢測試劑盒原理組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。8.PCR擴增產(chǎn)物;
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
Tropisetron 中文名:鹽酸托烷司瓊 分子式:C17H21ClN2O2 魚類促性腺釋放PCR檢測試劑盒 魚類促性腺釋放試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 魚類促性腺釋放試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:PCR檢測試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:魚類促性腺釋放試劑盒、魚類促性腺釋放eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Tropicamide 中文名:托吡卡胺 分子式:C17H20N2O2 魚類白介素1αPCR檢測試劑盒 魚類白介素1α試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 魚類白介素1α試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:PCR檢測試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:魚類白介素1α試劑盒、魚類白介素1αeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Trityl candesartan
cilexetil 中文名: 分子式:C52H48N6O6 魚促上腺皮質(zhì)PCR檢測試劑盒 魚促上腺皮質(zhì)試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 魚促上腺皮質(zhì)試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:PCR檢測試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:魚促上腺皮質(zhì)試劑盒、魚促上腺皮質(zhì)eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Trityl
candesartan 中文名: 分子式:C43H34N6O3 豬甘油三酯PCR檢測試劑盒 豬甘油三酯試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬甘油三酯試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:PCR檢測試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬甘油三酯試劑盒、豬甘油三酯eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Triptoquinone A 中文名: 分子式:C20H24O4 魚類狀腺原酸(T3)PCR檢測試劑盒
Atrial Natriuretic
Factor (1-28) (mouse, rabbit, rat), rANF
Apelin-36 (human)
Anti-Inflammatory Peptide 1
Annexin A1 (1-25)(dephosphorylated) (human) (Gly22)-Amyloid β-Protein (1-40)
Atrial Natriuretic
Factor (1-28) (human),α hANF, Carperiti
Apelin-17 (human,bovine, mouse, rat),Apelin Precursor (61-7 Endo-1a-Gly-Antho-RWamide II Annexin A1 (1-11)(dephosphorylated) (Gly21)-Amyloid β-Protein (1-40)
Aspartame-RelatedCompound
A, (2S,5S)-5-Benzyl-3,6-dioxo2-p
(Pyr1)-Apelin-13 (human,bovine, mouse, rat) Metamorphosin A Angiotensin III (Gln22)-Amyloid β-Protein (1-40)
DF-2-NH2 (Ala13)-Apelin-13(human, bovine, mouse,
rat) Antho-RWamide II Angiotensin I/II (5-8) Biotinyl-Amyloid β-Protein (1-40)
(Sar1,Tyr(Me)4)-Angiotensin II Amyloid β-Protein (38-40) (Met(O)35)-Amyloid β-Protein (25-35) Amyloid β-Protein (12-28) Amyloid β-Protein (1-40) (mouse, rat)
人β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)PCR檢測試劑盒 別稱:Aβ(1-42) ,Amyloid Beta 42,Amyloid Beta 42 Human Aβ1-42(Amyloid Beta 1-42) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組Aβ1-42濃度