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產(chǎn)品中心
產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:禽正呼腸孤病毒PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟

  • 產(chǎn)品型號(hào):BJ-R013291
  • 產(chǎn)品**:邦景
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
禽正呼腸孤病毒PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟可以檢測組織、細(xì)胞、血液等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況。
詳情介紹:

產(chǎn)品特點(diǎn):

◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;

◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;

◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;

◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

參數(shù)規(guī)格:

產(chǎn)品名稱: 禽正呼腸孤病毒PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟

英文名稱:  Avian OrthoreovirusRTPCR
產(chǎn)品貨號(hào): BJ-R013291

產(chǎn)品規(guī)格: 50T

產(chǎn)品分類: PCR檢測試劑盒

產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存:-20℃保存

產(chǎn)品有效期:一年

產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。


實(shí)驗(yàn)過程:

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

二、操作步驟

1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1(10pM)               2μl

      引物2(10PM)              2μl

      Taq酶(2U/μl)            1μl

      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。

2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。

3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

使用方法:

注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理(樣本處理區(qū))

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))

取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

禽正呼腸孤病毒PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣(樣本處理區(qū))

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;

9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

Trenbolone heptanoate  中文名:  分子式:C25H34O3    魚球蛋白MIgMPCR檢測試劑盒  

Trenbolone cyclohexylmethylcarbonate  中文名:群勃龍環(huán)己甲基碳酸酯  分子式:C26H34O4    魚類主要組織相容性復(fù)合體(MHC)PCR檢測試劑盒           

Trenbolone acetate  中文名:  分子式:C20H24O3    愈創(chuàng)木酚   50g

Trenbolone  中文名:群勃龍  分子式:C18H22O2    Guaiacol   100g

Trehalose  中文名:海藻糖  分子式:C12H22O11    鹽酸胍   100g

PTHIKWGD  APLP1-derived Aβ -like peptide (1-27), APL1β 27  H-β -Ala-Val-OH  AAAAAA  Prepro-Atrial Natriuretic Factor (104-123) (human)

PF  APLP1-derived Aβ -like peptide (1-25)  H-β -Ala-Trp-OH  D-AAAAA  Atriopeptin III (rat)

Peptide 6A  Sodefrin  H-β -Ala-Phe-OH  AAAAA  (Tyr0)-Atriopeptin II(rat)

4-Nitro-Z-GWG-OH  Ranatensin  H-β -Ala-Lys-OH  D-AAAA  Atriopeptin II (rat)

Mca-APK(Dnp)  Ranatachykinin A  H-β -Ala-Leu-OH  AAAA  Atriopeptin I (rat)

人α-黑色素細(xì)胞刺(αMSH)PCR檢測試劑盒 別稱:alpha-melanotropin, alpha-melanocortin, alpha-intermedin Human αMSH(Alpha-Melanocyte Stimulating Hormone) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測人血清、血漿或其他相關(guān)生物液體中天然及部分重組αMSH濃度。

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