參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱: 禽戊型肝炎病毒PCR檢測試劑盒原理
英文名稱: Avian Hepatitis E
Virus(aHEV)RTPCR
產(chǎn)品貨號: BJ-R013280
產(chǎn)品規(guī)格: 50T
產(chǎn)品分類: PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過程:一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
Tolvaptan 中文名:托伐普坦 分子式:C26H25ClN2O3 勻漿制作或抽提 Homogenate production or exaction
Toltrazuril 中文名:托曲珠利 分子式:C18H14F3N3O4S (皮膚骨骼肌腸肌肉等難勻特殊樣品) (the skin and skeletal muscle and
other hard uniform special sample)
Tolazoline 中文名:鹽酸妥拉唑林 分子式:C10H13ClN2 超氧化物歧化酶(SOD)檢測 Superoxide dismase (SOD)
detection
Tokinolide B 中文名: 分子式:C24H28O4 二(MDA)檢測
Malondialdehyde (MDA) detection
Tofacitinib 中文名:枸櫞酸托法替尼 分子式:C22H28N6O8 載脂蛋白B(ApoB)測定試劑盒(比濁法)
For-MA -OH CRAMP-18 (mouse) Mca-DEVDAPK(Dnp) Ac-LETD-AFC
C3a (72-77) (human)
For-AGSE-OH CRAMP (mouse)
DABCYL-YVADAPV-EDANS
Ac-LEHD-AMC (β -Ala70)-C3a
(70-77)
(Glu32)-Charybdotoxin Z-VEID-AFC
(DEVD)2-R110 Ac-LEHD-AFC C3a (70-77)
Charybdotoxin,ChTX Z-VDVAD-AFC
NEAYVHDAPVRSLN Ac-IETD-pNA (Trp63,Trp64)-C3a (63-77)
β -Casomorphin (1-4) amide (bovine) , Morphiceptin α -Casein (90-96) α -CGRP (23-37) (human) Acetyl-(Asn30,Tyr32)- Calcitonin (8-32) (salmon I) Bentiromide, BTPABA
人Toll樣受體2(TLR-2)PCR檢測試劑盒 別稱:CD282, TIL4 Human TLR-2(Toll-like Receptor 2) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組TLR-2濃度
禽戊型肝炎病毒PCR檢測試劑盒原理注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研