注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格：
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產(chǎn)品名稱 |
侵入性絲囊霉菌PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟 |
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英文名稱 |
Aphanomyces invadansPCR |
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貨號 |
BJ-R013263 |
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法：
注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
侵入性絲囊霉菌PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；
9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
Tetracaine 中文名：丁卡因 分子式：C15H24N2O2 度：98.0% 生存素 (survivin) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
Tetracaine 中文名：鹽酸丁卡因 分子式：C15H25ClN2O2 度：98.0% 無形體核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
Prilocaine 中文名：鹽酸丙胺卡因 分子式：C13H21ClN2O 度：98.0% 東方體核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
Dibucaine 中文名：鹽酸地布卡因 分子式：C20H30ClN3O2 度：98.0% 人皰疹病毒6型(HHV-6)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
Ropivacaine 中文名：鹽酸羅哌卡因 分子式：C17H27ClN2O 度：98.0% (OC43/HKU1)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
H-Nle-RF-NH2 Fmoc-PPPP-OH
SDGRG GRGDSPC VGDE
MRF Fmoc-PPP-OH
RFDS GRGDSP AGSE
LSSFVRIamide Fmoc-PF-OH
YRGDS GRGDSC Enterostatin (human,mouse, rat)
Neuropeptide
DF2 Fmoc-Phe-Ser(tBu)-OH N-Me-GRGDSP
GRGDS Enterostatin (bovine,
canine, porcine)
H-NRNFLRF-NH2 Fmoc-FF-OH KQAGDV GRGDNP CTAP
人L選擇素(SELL)PCR檢測試劑盒 別稱:CD62L, LAM1, LAM-1, LECAM1,Leu-8, LEU8, LNHR, LSEL, Lyam-1, LYAM1, PLNHR, TQ1 Human SELL(L-Selectin) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組SELL濃度