注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱： 類天花病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
英文名稱: Alastrim VirusPCR
產(chǎn)品貨號(hào)： BJ-R013246
產(chǎn)品規(guī)格： 50T
產(chǎn)品分類： PCR檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；
◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法：
注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū)；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
類天花病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；
9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
Taxilluside A 1661914-46-0 中文名： 分子式：C18H24O10
Humancytovillin/ezrin,CVLPCR檢測(cè)試劑盒人細(xì)胞絨毛蛋白/埃茲蛋白(CVL)PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
n-Butyl β-D-fructofuranoside 80971-60-4 中文名：基-β-D-果糖苷 分子式：C10H20O6 組織INSULI激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
Palmitone 502-73-8 中文名：棕櫚酮 分子式：C31H62O
Humanplasminogenactivatorinhibitor1，PAI-1ELISAKit人纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
9-Oxooctadeca-10,12-dienoic
acid 54232-58-5 中文名： 分子式：C18H30O3 兔子血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Acetylatractylodinol 61582-39-6 中文名：乙酰蒼術(shù)素醇 分子式：C15H12O3 Rat angiopoietin receptor Tie2 (ANG-R-Tie2) ELISA Kit 大鼠生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)PCR檢測(cè)試劑盒
Acetyl-(D-Arg10,Cys11,D-Phe14,Cys17)-β
-MSH (10-17) amide Myelin Basic Protein
(4-14)
Abz-Lys-Pro-Leu-Gly-Leu-Dap(Dnp)-Ala-Arg-NH2 Mca-PLGL-Dap(Dnp)-AR-NH2 LHRH (free acid)
Acetyl-(Cys11,D-2-Nal14,Cys18)-β
-MSH (11-22) amide
(Des-Gly77,Des-His78)- Myelin Basic Protein(68-84) (bovine) Ac-Pro-Leu-Gly-OH Mca-PLGLEEA-Dap(Dnp)-NH2 LHRH (1-5) (free acid)
(Deamino-Cys11,D-2-
Nal14,Cys18)-β -MSH (11-22) amide, JKC-3
(Des-Gly77,Des-His78)-Myelin Basic Protein (68-84) (guinea p CTT
Mca-PKPLAL-Dap(Dnp)-AR-NH2 LHRH
(1-6) (free acid)
β -MSH (monkey), β
-MSH(5-22) (human) Myelin Basic
Protein(83-99) (bovine) DABCYL-γ
-Abu-PQGL-Glu(EDANS)-AK-NH2 Peptide
74 LHRH (1-6) amide
β -MSH (porcine), β -Lipotropin (41-58) (porcine) Myelin Basic Protein (87-99) (human, bovine, rat) Dnp-RPLALWRS-OH Metorphamide (D-Leu6)-LHRH (1-8)(free acid)
人C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白3(C1QTNF3)PCR檢測(cè)試劑盒 別稱:C1QTNF3, C1ATNF3, CORCS, CORS, CORS-26, CORS26, CTRP3, C1q and tumor necrosis factor related protein 3, C1q and TNF related 3, Collagenous repeat-containing sequence 26 kDa protein, Secretory protein CORS26 Human C1QTNF3(C1q and Tumor Necrosis Factor Related Protein 3) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測(cè)Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組C1QTNF3濃度