產(chǎn)品特點(diǎn)：

◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；

◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

產(chǎn)品名稱： 胸膜肺炎放線桿菌PCR檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟

英文名稱:  Actinobacillus pleuropneumoniaePCR
產(chǎn)品貨號(hào)： BJ-R013223

產(chǎn)品規(guī)格： 50T

產(chǎn)品分類： PCR檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研

使用方法：

胸膜肺炎放線桿菌PCR檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

Stavudine  3056-17-5  中文名：司他夫定  分子式：C10H12N2O4    HumanAi-SomaticMuscleAibody,ASAELISAKit 人抗骨骼肌抗體(ASA)PCR檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Albendazole  54965-21-8  中文名：阿苯達(dá)唑  分子式：C12H15N3O2S    Humancytokeratin20,CK-20PCR檢測(cè)試劑盒人細(xì)胞角蛋白20(CK-20)PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

Fmoc-O-(benzylphospho)-L-threonine  175291-56-2  中文名：Fmoc-蘇氨酸磷酸芐酯  分子式：C26H26NO8P    組織HSV(HERPESSIMPLX)病毒定性檢測(cè)試劑盒20次

8-Phenyloctanol  10472-97-6  中文名：8-苯基辛醇  分子式：C14H22O    HumanPlateletFactor4,PF-4ELISAKit人血小板因子4(PF-4/CXCL4)PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

8-Phenyloctanoic acid  26547-51-3  中文名：8-苯基辛酸  分子式：C14H20O2    兔子脂聯(lián)素(ADP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

S6 Phosphate Acceptor Peptide  Scyliorhinin II  Secretin (porcine)  3-Mercaptopropionyl- YdWKVCF-NH2  Spantide II

Salusin-α (human)  Amyloid β /A4 Protein Precursor770 (667-676)  Secretin (5-27) (porcine)  (Tyr3,Orn5,Pen7)-Octreotate amide  (D-Pro2,D-Phe7,D-Trp9)-Substance P

Tyr-(D-Dab4,Arg5,D-Trp8)-cyclo-Somatostatin-14 (4-11)  SAP-I, Speract  Substance P (free acid)  Substance P (5-11)  (D-Pro2,D-Trp7?9)-Substance P

(D-2-Nal5,Cys6·11,Tyr7,D- Trp8,Val10,2-Nal12)- Somatostatin-  SA-Alloresact  Substance P-methyl ester  (D-Glu5,D-Trp7?9?10)-Substance P (5-11)  (D-Pro4,D-Trp7·9·10)-Substance P (4-11),Gpant-1, Ptt-SP (4-

D-Phe5,Cys6·11,N-Me-D-Trp8)-Somatostatin-14 (5-12) amide  Ac-Tyr(PO3H2)- Tyr(PO3H2)-Tyr(PO3H2)-Ile-Glu-OH  (p-Bz-Phe8)-Substance P,(Bpa8)-Substance P  (Pyr5)-Substance P (5-11)  (D-Pro4,D-Trp7?9,Nle11)-Substance P (4-11)

人ⅡD組磷脂酶A2(PLA2G2D)PCR檢測(cè)試劑盒 別稱:PLA2IID, SPLASH, sPLA2-IID, sPLA2S Human PLA2G2D(Phospholipase A2, Group ⅡD) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測(cè)Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組PLA2G2D濃度