注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱: 枝頂孢霉PCR檢測(cè)試劑盒圖片
英文名稱: Acremonium strictumPCR
產(chǎn)品貨號(hào): BJ-R013221
產(chǎn)品規(guī)格: 50T
產(chǎn)品分類: PCR檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
枝頂孢霉PCR檢測(cè)試劑盒圖片使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
Stanozolol 中文名:康力龍 分子式:C21H32N2O 度:98.0% 小鼠N端前腦素(-proBNP)PCR檢測(cè)試劑盒
Oxymetholone 中文名:康復(fù)龍 分子式:C21H32O3 度:98.0% 小鼠NOD樣受體-2(NOD-2)PCR檢測(cè)試劑盒
Mebendazole 中文名:甲苯咪唑 分子式:C16H13N3O3 度:98.0% 小鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)PCR檢測(cè)試劑盒
8-Hydroxy-7-iodo-5-quinolinesulfonic
acid 中文名:喹方 分子式:C9H6INO4S 度:98.0% 小鼠L苯解酶(PAL)PCR檢測(cè)試劑盒
Ornidazole 中文名:奧硝唑 分子式:C7H10ClN3O3 度:98.0% 小鼠KN-62PCR檢測(cè)試劑盒
Tuftsin Salusin-β (human) (Asn670,Leu671)-Amyloid β /A4 Protein
Precursor770 (667-676) Secretin
(rat) (D-Trp8,D-Cys14)-Somatostatin-14
Tuftsin (1-3) Sarafotoxin A
(Asn670,Leu671)-Amyloid β /A4 Protein Precursor770 (667-675) Suc-AAPD -pNA
Tyr-Somatostatin-14
WP9QY Sarafotoxin B
(Val671)-Amyloid β /A4 Protein Precursor770 (667-676) Suc-AAPD-pNA
(Tyr1)-Somatostatin-14
TNF-α (31-45)
(human) Sarafotoxin C, SRTX-C Arg-Glu(EDANS)-(Asn670,Leu671)-APP770
(668-675)-Lys(DABCYL)- Suc-AAPE-pNA (Tyr11)-Somatostatin-14
TNF-α (46-65) (human) (Nle6)-Sarafotoxin C (Asn670,Sta671,Val672)-Amyloid β /A4 Protein Precursor770 (6 Suc-AAPI-pNA Somatostatin-14 (3-10)
人Ⅰ型前膠原氨基端原肽(PⅠNP)PCR檢測(cè)試劑盒 別稱:P1NP, PINP, N-Propeptide Of Type I Procollagen, Procollagen I Amino Terminal Propeptide Human PⅠNP(Procollagen Ⅰ N-Terminal Propeptide) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測(cè)Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組PⅠNP濃度