產品名稱:龍眼肉染料法PCR鑒定試劑盒
英文名稱:Arillus longan
規(guī)格:
50次
貨號:BJ-01P3561
產品運輸:低溫運輸
產品保存:常溫
產品有效期:一年
產品特點:本產品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。公司產品僅用于科研
組成
1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶
2 酶標試劑 6ml×1瓶
3 酶標包被板 12孔×8條
4 樣品稀釋液 6ml×1瓶
5 顯色劑A液 6ml×1瓶
6 顯色劑B液 6ml×1/瓶
7 終止液 6ml×1瓶
8 標準品 0.5ml×1瓶
9 標準品稀釋液 1.5ml×1瓶
10 封板膜 2張
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
操作步驟
1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照隨貨說明書中圖表在小試管中進行稀釋。
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.龍眼肉染料法PCR鑒定試劑盒顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
113558-14-8
Ikarisoside F (Ikarisoside-F)
10mg Trichomonas stableri斯氏毛滴蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒
113558-14-8
Ikarisoside F (Ikarisoside-F)
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E-4031 11g Trichomonas foetus胎兒滴蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒
113558-89-7
E-4031 1500mg Trichomonas gallinae鴿毛滴蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒
1216659-54-9
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1216659-54-9
Ciprofloxacin-d8 (hydrochloride)
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1216659-54-9
Ciprofloxacin-d8 (hydrochloride)
5mg Cupixi virus(CPXV)庫皮科斯病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒
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1216665-49-4
APY29 10mM(in1mLDMSO) Bovine Norovirus(BoNoV)牛諾如病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒
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服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務。