產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST) |
0.2g或者0.2mL |
BJ-S0144 |
樣品制備:公司產(chǎn)品僅用于科研
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (通過過濾)。
4 ). 通過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、操作簡便:可將試劑混合成單試劑操作,全程約50分鐘,可測48例左右樣本。
2、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放12個(gè)月有效,試劑配制后至少能存放6個(gè)月;呈色穩(wěn)定,顯色后24小時(shí)吸光度不變。
3、再現(xiàn)性好:批內(nèi)CV=2.3%,批間CV=5.34%。
4、回收試驗(yàn): X =101.8%。
5、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
6、適用于細(xì)胞樣本。
操作方法:
標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
以組織樣本為例,參照組織樣本檢測方法,取5個(gè)離心管,按下表加入下列試劑:
混勻后,每管加1mL雙蒸水,快速混勻,置于沸水浴中煮沸50min,快速放至冰水中冷卻,3000r/min、4℃離心15min,取上清于532nm讀數(shù)。
樣本檢測
血清以及細(xì)胞培養(yǎng)上清:
取0.25mL樣品加入到1.5mL試劑C溶液中,混勻后,加入0.3mL試劑D,混勻后于沸水浴中煮沸40min,快速放入冰水中冷卻,3000r/min、4℃離心15min,取上清于532nm讀數(shù)。
組織勻漿液
取0.2mL勻漿上清液,加入0.2mL試劑B,混勻后加入1.5mL試劑C和1.5mL試劑D,混勻,每管加入1mL雙蒸水,快速混勻。沸水浴中煮沸50min,快速放入冰水中冷卻,3000r/min、4℃離心15min,取上清于532nm讀數(shù)。
培養(yǎng)細(xì)胞樣本
取0.2mL細(xì)胞裂解液,加入1.5mL試劑C和1.5mL試劑D,混勻,每管加入1mL雙蒸水,快速混勻。沸水浴中煮沸50min,快速放入冰水中冷卻,3000r/min、4℃離心15min,取上清于532nm讀數(shù)。
谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)結(jié)果判斷
以標(biāo)準(zhǔn)品含量作為橫坐標(biāo),OD值作為縱坐標(biāo),以平滑線連接各標(biāo)準(zhǔn)品的坐標(biāo)點(diǎn)。通過標(biāo)本的OD值可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出其濃度。
若標(biāo)本OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限,應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測,計(jì)算濃度時(shí)應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。
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