菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純**菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的**菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在**上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些**菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
產(chǎn)品名稱:腸膜明串珠菌
產(chǎn)品貨號:BJ-J13500
拉丁文: Leuconostoc mesenteroides
提供形式: 凍干物
**等級: 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生右旋糖酐,做臨床輸液用
培養(yǎng)基: MRS培養(yǎng)基:酪胨 10.0g,牛肉粉 8.0g,酵母粉 4.0 g,葡萄糖 20.0 g,硫酸鎂 0.2 g,乙酸鈉 5.0 g,檸檬酸三銨 2.0 g,磷酸氫二鉀 2.0 g,硫酸錳 0.05 g,吐溫80 1.0 g,蒸餾水 1000mL。pH6.2±0.2。121℃,15mim。
生長條件: 25℃,兼性厭氧,2-3天
存儲條件: 真空冷凍干燥法
微生物培養(yǎng)方法:產(chǎn)品僅用于科研
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
腸膜明串珠菌種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為種子,把種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
公司專業(yè)代理ATCC菌種,質(zhì)量保證,為大中型科研提供嚴(yán)格質(zhì)量體系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ標(biāo)準(zhǔn)菌株。
豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA檢測試劑盒GuineaPigcalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISAKit
96T/48T 米諾地爾(硫酸鹽)敏樂啶(標(biāo)準(zhǔn)品) Minoxidil Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
牛凝血因子XIIIA鏈(F13A1)試劑盒 Bovine Coagulation factor XIII A chain,F13A1 ELISA
kit 咪唑司汀
Mizolastine 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
英文名稱HumanMyosinELISAKit人肌球蛋白(Myosin)規(guī)格:96T/48T 嗎替麥考酚酯/霉酚酸酯 Mycophenolate
Mofetil 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
動物組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10 嗎替麥考酚酯/霉酚酸酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Mycophenolate
Mofetil 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
RatproteinkinaseB,PKBELISA試劑盒大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 奈拉濱
Nelarabine 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,細(xì)胞培養(yǎng)級
小鼠天冬酸轉(zhuǎn)酶2(AST2)ELISA試劑盒 ,英文名: AST2 ELISA Kit 醋酸奈西立肽 Nesiritide Acetate 質(zhì)量規(guī)格:>95%
豚鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA檢測試劑盒GuineaPigEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit
96T/48T 硫酸奈替米星
Netilmicin Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:≥595 μg/mg,BR
牛凝血酶抗凝血酶Ⅲ復(fù)合物(TAT-III)試劑盒 Bovine
Thrombin-aithrombin III Complex,TAT-III ELISA Kit 硫酸奈替米星(標(biāo)準(zhǔn)品)
Netilmicin Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
英文名稱HumanMyoglobinELISAKit人肌紅蛋白(MYO)ELISAKit規(guī)格:96T/48T 制霉菌素 Nystatin 質(zhì)量規(guī)格:USP級,4400u/mg
動物軟骨組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10 奧氮平 Olanzapine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
SP6核糖核酸聚合酶
SP6 RNA Polymerase
產(chǎn)品規(guī)格:BR,20u/ul
包裝:500U/2000u
級別:BR
分子量:單體約98kDa
來源:大腸桿菌細(xì)胞,含有編碼相應(yīng)RNA聚合酶的克隆基因
濃度:20u/ul(≥100U/ul,HC)
活力定義:是指在37℃、60分鐘內(nèi)將1nmol AMP合成摻入到寡聚核苷酸片段(DE-81)光吸收形式)所需的酶量
酶活性分析混合物:40mM Tris-HCL(PH8.0), 10mM DTT, 6mM MgCL2,
2mM 亞精胺,0.5mM 各種NTP,
0.6MBq/ML(3H).-ATP和20ug/ml含有相應(yīng)啟動子序列的質(zhì)粒DNA
保存緩沖:每種聚合酶保存于50mM Tris-HCL(PH8.0), 5mM DTT, 0.1mg/ml
BSA,150mM NaC1, 0.5mM ELUGENT去污劑和50%(V/V) 甘油
性狀:略帶銅藍(lán)色結(jié)晶粉末。屬于銅藍(lán)蛋白家族,分子量為140kD,由兩個相同亞基(70kD)構(gòu)成。是一種氧化還原酶。催化抗壞血酸與氧作用**脫氫抗壞血酸??箟难崾且环N不飽和的多羥化合物,以內(nèi)酯形式存在,在2位與3位碳原子之間烯醇羥基上的氫可游離成H+,故具酸性
用途:生化研究
苞肉粒1米 HumancecropinB,CecBELISA試劑盒人肽B(CecB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T