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產(chǎn)品中心
產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:ARPE-19:視網(wǎng)膜上皮細胞保存

  • 產(chǎn)品型號:T25m2
  • 產(chǎn)品**:邦景
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
ARPE-19:視網(wǎng)膜上皮細胞保存在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持ARPE-19:視網(wǎng)膜上皮細胞保存活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
詳情介紹:

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備。

產(chǎn)品名稱

ARPE-19:視網(wǎng)膜上皮細胞保存

規(guī)格 

T25m2

貨號

BJ-X63343

描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細胞株;(2)細胞株數(shù)量約 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、酵母。
     發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務(wù)標準。
     保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮細胞株,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研。

細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(GIBCO,貨號1199500bt,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。也可根據(jù)實驗需要選擇懸浮培養(yǎng)基,使293T細胞懸浮生長。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

注意事項:
1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精(建議配置75%的酒精的水是過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。 

鹽酸鑭六水(>99%,BR)  Lanthanum (III) chloride, hexahydrate  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 動物組織肌質(zhì)網(wǎng)橫小管(TTube)分離試劑盒10

三氧化鉬(>98%,BR)  Molybdic oxide  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 動物組織肌質(zhì)網(wǎng)三聯(lián)體(IAD)分離試劑盒10

木瓜蛋白酶懸浮液  Papain 2x crystallized from papaya Latex  質(zhì)量規(guī)格:比活度:>20 U/mgBC 動物組織基因組DNA分離試劑盒50

苯磺酸鈉(>98%,BR)   benzenesulfonate  質(zhì)量規(guī)格:>98%BR 動物組織鎂ATP(Mg++-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20

過氧化物歧化酶(SOD)  Superoxide dismutase from Bovine Erythrocytes(SOD)  質(zhì)量規(guī)格:比活度:>5000 U/mg,BC 動物組織膜性囊泡(RSOVIOV)制備試劑盒20

三十烷醇(>98%,植物級)  Triacontanol  質(zhì)量規(guī)格:>98%,植物級 動物組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)粗提分離試劑盒10

4-羥基(>98.0%,BR)  4-Hydroxybenzaldehyde  質(zhì)量規(guī)格:>98.0%BR 動物組織羥脯氨酸(hydroxyproline)比色法定量檢測試劑盒20

低內(nèi)牛血清白蛋白  Albumin, from bovine pH 7.0 Low endotoxin  質(zhì)量規(guī)格:>97%,Biotech Grade 動物組織羥脯氨酸(HYP)比色法定量檢測試劑盒20

梭菌蛋白酶  Clostripain  質(zhì)量規(guī)格:酶活:>50U/mg,進分 動物組織氫/ATP(H+/K+-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20

2'-脫氧鳥苷-5'-一二鈉鹽(分子生物學(xué)級)  dGMP, 2'-Deoxyguanosine-5'-monophosphate di salt  質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級 動物組織氫ATP(H+-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20
動物組織肌質(zhì)網(wǎng)粗提分離試劑盒10 二環(huán)己基碳二亞胺(>99%,BR)  DCC, Dicyclohexylcarbodiimide  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

動物組織肌質(zhì)網(wǎng)橫小管(TTube)分離試劑盒10 鹽酸鑭六水(>99%,BR)  Lanthanum (III) chloride, hexahydrate  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

動物組織肌質(zhì)網(wǎng)三聯(lián)體(IAD)分離試劑盒10 三氧化鉬(>98%,BR)  Molybdic oxide  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

動物組織基因組DNA分離試劑盒50 木瓜蛋白酶懸浮液  Papain 2x crystallized from papaya Latex  質(zhì)量規(guī)格:比活度:>20 U/mgBC

動物組織鎂ATP(Mg++-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20 苯磺酸鈉(>98%,BR)   benzenesulfonate  質(zhì)量規(guī)格:>98%BR

動物組織膜性囊泡(RSOVIOV)制備試劑盒20 過氧化物歧化酶(SOD)  Superoxide dismutase from Bovine Erythrocytes(SOD)  質(zhì)量規(guī)格:比活度:>5000 U/mg,BC

動物組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)粗提分離試劑盒10 三十烷醇(>98%,植物級)  Triacontanol  質(zhì)量規(guī)格:>98%,植物級

動物組織羥脯氨酸(hydroxyproline)比色法定量檢測試劑盒20 4-羥基(>98.0%,BR)  4-Hydroxybenzaldehyde  質(zhì)量規(guī)格:>98.0%BR

動物組織羥脯氨酸(HYP)比色法定量檢測試劑盒20 低內(nèi)牛血清白蛋白  Albumin, from bovine pH 7.0 Low endotoxin  質(zhì)量規(guī)格:>97%,Biotech Grade

動物組織氫/ATP(H+/K+-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20 梭菌蛋白酶  Clostripain  質(zhì)量規(guī)格:酶活:>50U/mg,進分
大鼠卵巢組織提取物ARPE-19:視網(wǎng)膜上皮細胞保存Ovarian: Normal Rat Ovarian Derivatives】 規(guī)格50rxn/ 10μg/ 200μg

大鼠輸尿管組織提取物【Ureter: Normal Rat Ureter Derivatives】 規(guī)格50rxn/ 10μg/ 200μg

大鼠尿道組織提取物【Urethra: Normal Rat Urethra Derivatives】 規(guī)格50rxn/ 10μg/ 200μg

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