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生長因子受體結(jié)合蛋白2抗體的制備過程

日期:2024-11-25 01:23
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摘要: 生長因子受體結(jié)合蛋白2抗體: 1. 免yi 原的制備 普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免yi原。 小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免yi原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。 2. 免yi動物 常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量**時需要用到狗、綿羊、山羊等。 3. 免yi血清的收...

生長因子受體結(jié)合蛋白2抗體


1. 免yi 原的制備


普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免yi原。


小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免yi原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。


2. 免yi動物


常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量**時需要用到狗、綿羊、山羊等。


3. 免yi血清的收集


一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。


4. 免yi血清的純化與鑒定


得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。


5. 免yi血清的保存


建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)chu菌并添加防腐劑。