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實(shí)時(shí)定量PCR反應(yīng)試驗(yàn)結(jié)果處理
日期：2024-11-24 22:53
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摘要：
實(shí)時(shí)定量PCR反應(yīng)試驗(yàn)結(jié)果處理：
1、如果有標(biāo)準(zhǔn)曲線，按照標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算。
2、一般都是相對(duì)量，則用delta delta CT方法來計(jì)算。
3、舉例如下：對(duì)照組基因A的CT值為20， 內(nèi)參（比如βactin)CT值15。實(shí)驗(yàn)組基因A CT值18，內(nèi)參CT值14。
4、首先算加樣量：delta CT=15-14=1。2的1次方是2。也就是說實(shí)驗(yàn)組的加樣量是對(duì)照組的2倍?；駻: delta CT=20-18=2。2的2次方是4。也就是說基因A的量在實(shí)驗(yàn)組是對(duì)照組的4倍。但是由于加樣量是2倍，所以4處以2=2，后的相對(duì)量是2倍。
5、幾點(diǎn)注意：必須確定擴(kuò)增的特異性...
實(shí)時(shí)定量PCR反應(yīng)試驗(yàn)結(jié)果處理：
1、如果有標(biāo)準(zhǔn)曲線，按照標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算。
2、一般都是相對(duì)量，則用delta delta CT方法來計(jì)算。
3、舉例如下：對(duì)照組基因A的CT值為20， 內(nèi)參（比如βactin)CT值15。實(shí)驗(yàn)組基因A CT值18，內(nèi)參CT值14。
4、首先算加樣量：delta CT=15-14=1。2的1次方是2。也就是說實(shí)驗(yàn)組的加樣量是對(duì)照組的2倍?；駻: delta CT=20-18=2。2的2次方是4。也就是說基因A的量在實(shí)驗(yàn)組是對(duì)照組的4倍。但是由于加樣量是2倍，所以4處以2=2，后的相對(duì)量是2倍。
5、幾點(diǎn)注意：必須確定擴(kuò)增的特異性，只有相同目標(biāo)的CT值才能相減（擴(kuò)增效率有可能不同），2的某次方只是理論值，實(shí)際擴(kuò)增效率低于2，不用Syber Green。