原代與傳代細胞培養(yǎng)區(qū)別分析
區(qū)別一:定義不同
原代細胞培養(yǎng):原代培養(yǎng)是指由體內(nèi)取出組織或細胞進行的首ci 培養(yǎng),也叫初代培養(yǎng)。
傳代細胞培養(yǎng):傳代培養(yǎng)是指需要將培養(yǎng)物分割成小的部分,重新接種到另外的培養(yǎng)器皿(瓶)內(nèi),再進行培養(yǎng)的過程。對單層培養(yǎng)而言,80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段。
區(qū)別二:特點不同
原代細胞培養(yǎng):與體內(nèi)原組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動上相似性大。由于培養(yǎng)的細胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段。同時也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。
傳代細胞培養(yǎng):當原代培養(yǎng)成功以后,隨著培養(yǎng)時間的延長和細胞不斷分裂,一則細胞之間相互接觸而發(fā)生接觸性抑制,生長速度減慢甚至停止;另一方面也會因營養(yǎng)物不足和代謝物積累而不利于生長或發(fā)生中毒。
區(qū)別三:生存率不同
原代細胞培養(yǎng):過程相對復雜,培養(yǎng)條件要求也更高。
傳代細胞培養(yǎng):一般普通培養(yǎng)條件下都容易生存,傳代細胞容易增殖。
區(qū)別四:原理不同
原代細胞培養(yǎng):將動物機體的各種組織從機體中取出,經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細胞得以生存、生長和繁殖,這一過程稱原代培養(yǎng)。
傳代細胞培養(yǎng):當細胞在培養(yǎng)瓶中長滿后就需要將其稀釋分種成多瓶,細胞才能繼續(xù)生長。這一過程就叫傳代。傳代培養(yǎng)可獲得大量細胞供實驗所需。傳代要在嚴格的無菌條件下進行,每一步都需要認真仔細的無菌操作。