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PCR反應(yīng)DNA的變性
日期：2024-11-25 01:08
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摘要：
DNA變性是指核酸雙螺旋結(jié)構(gòu)中堿基對(duì)的氫鍵斷裂，使得雙鏈變?yōu)閱捂湹倪^(guò)程。
對(duì)雙鏈DNA進(jìn)行加熱可以使其發(fā)生變性，當(dāng)溫度升高到一定高度時(shí)，DNA在260nm處的吸光度會(huì)突然發(fā)生明顯的上升，并達(dá)到zui 大值，之后溫度繼續(xù)上升，其吸光度也不會(huì)發(fā)生明顯變化，若以溫度對(duì)DNA溶液的260nm吸光度做圖，會(huì)得到典型的DNA變性S型曲線。
DNA的變性是在一個(gè)很窄的溫度范圍內(nèi)發(fā)生的，通常將核酸加熱變性過(guò)程中，紫外光吸收值達(dá)到zui 大值50%時(shí)的溫度稱(chēng)為核酸的熔解溫度 (Tm, melting temperature)。
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DNA變性是指核酸雙螺旋結(jié)構(gòu)中堿基對(duì)的氫鍵斷裂，使得雙鏈變?yōu)閱捂湹倪^(guò)程。
對(duì)雙鏈DNA進(jìn)行加熱可以使其發(fā)生變性，當(dāng)溫度升高到一定高度時(shí)，DNA在260nm處的吸光度會(huì)突然發(fā)生明顯的上升，并達(dá)到zui 大值，之后溫度繼續(xù)上升，其吸光度也不會(huì)發(fā)生明顯變化，若以溫度對(duì)DNA溶液的260nm吸光度做圖，會(huì)得到典型的DNA變性S型曲線。
DNA的變性是在一個(gè)很窄的溫度范圍內(nèi)發(fā)生的，通常將核酸加熱變性過(guò)程中，紫外光吸收值達(dá)到zui 大值50%時(shí)的溫度稱(chēng)為核酸的熔解溫度 (Tm, melting temperature)。
1. 特定核酸分子的Tm值與其G+C含量成正相關(guān)，GC% = (Tm-69.3) × 2.44；
2. Tm值的大小還與核酸分子的長(zhǎng)度有關(guān)，核酸分子越長(zhǎng)，Tm值越大；
3. 粒子強(qiáng)度越高，熔解溫度越高，熔解溫度范圍越窄。