ELISA標(biāo)本的應(yīng)用注意事項
ELISA的檢測目的是為了實驗提供準(zhǔn)確的實驗依據(jù),為了保證實驗數(shù)據(jù)的可靠性,在實驗過程中必須堅持的質(zhì)量控制和全過程質(zhì)量控制,在收集標(biāo)本前都必須有一個完整的計劃。下面了解ELISA標(biāo)本的應(yīng)用注意事項:
1、每個樣本量收集體積=100ulx檢測種類,如果要做復(fù)孔,標(biāo)本量收集體積=100ulx檢測種類x2
2、樣本收集后若在一周內(nèi)進(jìn)行檢測可保存于2-8°C,若不及時檢測,請進(jìn)行分裝,凍存于-20°或-80°C,避免反復(fù)凍融
3、試劑盒的檢測范圍不等同于樣本中待測物的濃度范圍,建議實驗前通過相關(guān)文獻(xiàn)預(yù)估樣本中待測物的濃度并通過預(yù)實驗確定樣本。
4、血清標(biāo)本采集是應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解是會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色
5、為了保證尿液檢測的準(zhǔn)確性,必須正確收集尿液標(biāo)本和保存,收集尿液的容器必須要清潔干燥,使用一次性的容器,避免因用藥并清潔不到而造成的污染,尿液樣本必須新鮮,留取后,應(yīng)及時檢測或保存
6、標(biāo)本宜在新鮮是檢測如有xi 菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。如在冰箱中保存過久,其中可能發(fā)生聚合,間接法ELISA中樂視本底加深,
7、反復(fù)凍融會使蛋白效價降低,所以待測樣本如需多次檢測,宜少量分裝凍存。