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細(xì)胞的復(fù)蘇流程
日期:2024-11-25 03:02
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摘要:
細(xì)胞的復(fù)蘇流程:
1.佩戴眼鏡和手套,從液氮罐中取出冷凍管。
2.迅速放入37℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),在1分鐘內(nèi)使其完全融化,然后在無菌下取出細(xì)胞。
3.在150g速度下離心5~10分鐘,棄去上層液
4.加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,接種濃度1×109 cell/L,置37℃溫箱靜置培養(yǎng)
5.次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。
6.若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代。
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細(xì)胞的復(fù)蘇流程:
1.佩戴眼鏡和手套,從液氮罐中取出冷凍管。
2.迅速放入37℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),在1分鐘內(nèi)使其完全融化,然后在無菌下取出細(xì)胞。
3.在150g速度下離心5~10分鐘,棄去上層液
4.加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,接種濃度1×109 cell/L,置37℃溫箱靜置培養(yǎng)
5.次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。
6.若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代。
注意事項(xiàng):
在細(xì)胞復(fù)蘇操作時(shí),應(yīng)注意融化凍存細(xì)胞速度要快,可不時(shí)搖動(dòng)冷凍管,使之盡快通過*易受損的溫度段(-5~0℃)。這樣復(fù)蘇的凍存細(xì)胞存活率高,生長及形態(tài)良好。