注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允?/span>DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）  1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法：
注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
YAC-1細(xì)胞，瘤細(xì)胞 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞,HT-29細(xì)胞 CM-H021人前列腺平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL甾醇；(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Ergosterol

大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞;RBL-1甾醇(90%)質(zhì)量規(guī)格：>90%,BRErgosterol

GFRA1 Others Mouse 小鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 蔓荊子黃素（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Vitexicarpin

雪旺氏細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)芒果苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Mangiferin

ICAM1 Others Rat 大鼠 ICAM1 / CD54 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 嗎替麥考酚酯-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Mycophenolate Mofetil-d4
ECM1 Others Mouse 小鼠 ECM1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-α-基-β-羥基，英文名或英文縮寫：L-Threonine，級別：BR，99%，規(guī)格：10克

人色素瘤細(xì)胞;A875BOC-L-天門冬酸β... Boc-Asp(OBzl)-OH (HPLC,≥99.0) 7536-58-5 5G 通用試劑

IL18RAP Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18RAP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 流醋亞鐵銨;馬爾氏鹽;低鐵礬;亞鐵銨礬;流醋低鐵銨;六水合流醋亞鐵銨;流醋亞鐵銨;六水合流醋鐵銨;六水合流醋鐵(Ⅱ)銨 Fqrrous cluM;Fqrrous cMMoniuM sulfctq;Mohr'sclt 7783-82-9

人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL5′-CTP，4Na5-胞嘧啶核苷三嶙酸四鈉鹽溶液5UUSP級，98%

LLC細(xì)胞，小鼠肺癌細(xì)胞 CHO(中國倉鼠卵巢細(xì)胞) 恒河猴肺細(xì)胞;RM-L1姆沙伯 P AW DMCSChromosorb P AW-DMCS
豬圓環(huán)病毒Ⅰ型熒光PCR檢測試劑盒非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1NZYMBROTH,POWDERNZYM 肉湯, 粉末生物技術(shù)級粉末RT不sigma

IFNGR1 Others Human 人 IFNγR1 / CD119 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3-溴炳同醋 BroMopyruvic ccid 1113-29-3

豹貓肌肉成纖維樣細(xì)胞;LCM4詹納斯綠 B Janus Green B (certified by the Biolog... 2869-83-2 1G 染色劑

IFNA13 Others Mouse 小鼠 IFNA13 / Ierferon alpha-13 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 威斯塔霉素，英文名或英文縮寫：Ribostamycin Sulfate salt，級別：BR，<62.5 μg/ml，規(guī)格：1克

JEG-3 人絨毛膜癌細(xì)胞(錄化)