注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允?/span>DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）  1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法：
注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
IL1B Protein Mouse 重組小鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白L-甲硫氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品L-Mine

NCI-H596(人肺腺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 A10(大鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞)L-甲硫氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRL-Mine

CL-0326Caki-2(人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2L-胱氨酸質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品L-Cystine

CD36 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD36 / SCARB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-苯丙氨酸乙酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRH-Phe-OEt.HCl

人成纖維細(xì)胞-新生兒總RNAHDF-n NA甘氨酸乙酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRGlycine ethyl ester
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY1022 人神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLN-6-(δ2-異戊1基)-腺嘌呤質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口N-6-(δ2-Isopentenyl)-adenine

人小膠質(zhì)細(xì)胞總RNAHM NA9-(2',3',5'-三-氧基-苯甲基-β-D-阿糖)腺嘌呤質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口9-(2',3',5'-Tri-O-benzyl-β-D-arabinofuranosyl)adenine

CD68 Others Rat 大鼠 CD68 / Macrosialin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 紅-9-(2-羥基-3-壬烷基)腺嘌呤鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口EHNA

人上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL2-氟腺嘌呤質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口2-Fluoroadenine

COS-7細(xì)胞，SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞 293T/17 [HEK 293T/17] (人胚腎細(xì)胞) 雜交瘤(B類);Z1510C6D10F4G62-(4-tert-丁苯基)嘧啶(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)2-(4-tert-Butylphenyl)pyridine
豬牛羊布魯氏菌病熒光PCR檢測試劑盒HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) FMN-Na核黃素-5-嶙酸鈉鹽25克超，98%

人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞HUMSC商陸皂苷辛 Esculentoside H (HPLC,≥98%) 66656-92-6 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品

猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞;RF/6A 膠質(zhì)瘤細(xì)胞，SHG44細(xì)胞 RD(惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞)拂喹 Flumqinoneq4832/2/6

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY1002酸性綠5，英文名或英文縮寫：Light green SF yellowish，級(jí)別：AR，40-44.5%，規(guī)格：5克

NOG Others Human 人 Noggin / NOG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硅藻土NNA