注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允?/span>DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）  1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法：
注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
MCF-7/ER36細(xì)胞，人癌細(xì)胞 小鼠胰島素瘤β細(xì)胞(NOD/Lt轉(zhuǎn)基因小鼠，SV40巨T抗原),NIT-1細(xì)胞 MDA-MB-231(ATCC來源), 人癌細(xì)胞敵草腈(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Dichlobenil

MKN-28(人胃癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2乙二醇苯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)Ethylene glycol monophenyl ether

HUVEC Growth Medium 2pooled Pellet #N/A > 1 mio.cells 前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基PAM乙二醇苯(standard for GC,≥99.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥99.5%(GC)Ethylene glycol monophenyl ether

CL-0399NCI-H295R(人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2O-芐基-L-酪氨酸芐酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：0.985O-Benzyl-L-tyrosine benzyl ester

EPHA7 Others Rat 大鼠 EphA7 / EHK3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) O-芐基-L-酪氨酸甲酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：0.985O-Benzyl-L-tyrosine methyl ester
IMR-32(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×21,1'-二萘胺(>98.0%(HPLC)(N))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(N)1,1'-Dinaphthylamine

Promocell C-21060 Airway Epithelial Cell GrowthMedium, 呼吸道上皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml2,2'-二萘胺(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)2,2'-Dinaphthylamine

人星形膠質(zhì)細(xì)胞裂解物HAL1,2'-二萘胺(升華精制品)(>98.0%(HPLC)(N))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(N)1,2'-Dinaphthylamine (purified by sublimation)

HBEGF Others Human 人 HBEGF / D 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)  N,N',N''-三苯基-1,3,5-苯三胺(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)N,N',N''-Triphenyl-1,3,5-benzenetriamine

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;SW620 [SW 620;SW-620]3-吲哚乙酸(IAA)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR3-Indoleacetic acid
致病性大腸桿菌熒光PCR檢測試劑盒EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;HH-29血清兔抗羊IgGshēng huà shì jì容量：1000只/袋

ADAMTSL1 Others Human 人 ADAMTSL1 / PUNCTIN 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 一水肌酸 Creatine Monohydrate,≥98% 6020-87-7 25G 通用試劑

CL-0413PC-3M-2B4(人前列腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株)5×106cells/瓶×2錄化高鐵(陰涼);錄化鐵;三錄化鐵;錄化高鐵 Iron(III) chloridq solution;Iron (III) chloridq hydrctqd;Iron(III) chloridq;Fqrric sclts 1002-77-1

人絨毛間充質(zhì)成纖維細(xì)胞 人皮膚成纖維細(xì)胞，HSF細(xì)胞 NOR-10(小鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞)WATER,STERILE,NON-DEPC水HPLC級透明無色液體RTsigma

人T細(xì)胞白血病細(xì)胞;HuT 787789-75-5扶化鈣;扶石CalciuM fluoride;Fluorspar