注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進(jìn)行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）  1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法：
注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
NCI-H358(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 PC-12(腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞)富馬酸酮替芬質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRKetotifen fumarate

CL-0464USMC(大鼠血管平滑肌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2富馬酸酮替芬(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Ketotifen fumarate

CD44 Others Human 人 CD44 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 倍他米質(zhì)量規(guī)格：>98% Betamethasone

人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞RNAHIBEpiC miRNA5 μg倍他米（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98% ,標(biāo)準(zhǔn)品Betamethasone

5637(HTB-9)細(xì)胞，人膀胱癌細(xì)胞 大鼠肝癌細(xì)胞(癌細(xì)胞接種到肝臟成瘤),Walker-256細(xì)胞 MLF, 小鼠成纖維細(xì)胞比阿培南質(zhì)量規(guī)格：度>97%Biapenem
人成纖維母細(xì)胞-HDF-a2'-(二芐氨基)-6'-(二乙氨基)熒烷(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)2'-(Dibenzylamino)-6'-(diethylamino)fluoran

CGB5 Others Human 人 CGB5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3',6'-二甲氧基熒烷(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)3',6'-Dimethoxyfluoran

家兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;2012083MSC1,1'-亞甲基二-2-萘酚(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)1,1'-Methylenedi-2-naphthol

二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr- 食管癌細(xì)胞，TE-11細(xì)胞 B82細(xì)胞，鼠細(xì)胞系2-萘基芐基(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)Benzyl 2-Naphthyl Ether

B16-F10, 小鼠色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 Mouse5-溴吲哚 質(zhì)量規(guī)格：>99%5-Bromoindole
貓細(xì)小病毒熒光PCR檢測試劑盒CM-H080人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLYEASTnitnOGENBASEW/OAMINO&AMM酵母氮源(YNB),不含基酸,不含學(xué)級100GRT

小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞;CT26.WT [CT26WT] 小鼠腸上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL滅瘟速S言醋鹽 ≥98.0% (HPLC) BLcSTICIDIN S xy7noCHLORIDq3213-3-9

RA, 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞 RattusAntimony(III)oxide銻白100克AR，98%

ACVR1B Others Human 人 ALK4 / ACVR1B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) AGAROSEI/TAEBLEND1.0%瓊脂糖 - TAE 混合物 1.0%生物技術(shù)級100GRT

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0919(營養(yǎng)瓊脂)