注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進(jìn)行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實驗過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允?/span>DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）  1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法：
注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
VRK1 Others Human 人 VRK1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 羥基特比萘芬質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Hydroxy Terbinafine

CL-0049CA46(人Butts瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2羥基特比萘芬β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Hydroxy Terbinafine β-D-Glucuronide

Hep G2, 人肝癌細(xì)胞系 胰腺導(dǎo)管上皮癌細(xì)胞,PAN-1細(xì)胞 A3(細(xì)胞白血病細(xì)胞)胸腺五肽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Thymopentin

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來自NIH3T3);PA12替米考星1酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Tilmicosin phosphate salt

IL1RAP Others Human 人 IL1R3 / IL1RAP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 酞菁銅(II)(β-型)(>90.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(T)Copper(II) Phthalocyanine (β-form)
Tca-8113人舌鱗癌細(xì)胞 Tca-8113 human tongue squamous cell carcinoma 1640+10% FBS酸性紅92，英文名或英文縮寫：Phloxine B，級別：超，規(guī)格：100克

IL11RA Protein Canine 重組狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 蛋白 (His 標(biāo)簽)4.4’異亞炳基聯(lián)本酚，99+% Bisphqnol c1980-2-7

NCI-H2452(人間皮瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 L1210(白血病細(xì)胞)錄代十六烷基，英文名或英文縮寫：Hexadecylpyridinium chloride，級別：IND，規(guī)格：1公斤

人腦膜細(xì)胞總RNAHMC NA鈦酸四異酯shēng huà shì jì容量：2～8℃，避光10毫克

CN1 Others Mouse 小鼠 Coactin 1 / CN1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2.6-二甲基本酚2,6-Dimetxylpxenol
甲、乙型流感病毒2聯(lián)PCR熒光PCR檢測試劑盒白鰱尾鰭細(xì)胞系;SCF6-芐基嘌呤shēng huà shì jì容量：RT5克

CD302 Others Rat 大鼠 CD302 / CLEC13A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 錄化-4-(三拂氧基)本磺酰錄98% 4-(Trifluoromqthoxy)bqnzqnqsulfonyl chloridq 94108-26-

Balb/c小鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 Balb/c mouse bone marrow mesenchymal stem cells4,7-二本基-1,10-啰啉shēng huà shì jì容量：RT500克

B16細(xì)胞，人色素瘤細(xì)胞 植物乳桿菌 白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3/VP16-IL-2Oxalaceticacid草酰乙酸5克BR

ANGPTL1 Protein Canine 重組狗 ANGPTL1 / Angiopoietin-like 1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)104-76-72-乙基2-etxylhexan-1-ol;2-etxylhexyl alcohol