參數規(guī)格:
產品名稱 |
鵝細小病毒熒光PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號 |
BJ-R015215 |
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允?/span>DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5μl
dNTP mixl
4μl
引物1(10pM)
2μl
引物2(10PM)
2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質控品及陰性質控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
取N個(N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品)PCR反應管,每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,轉移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質控品和陽性質控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉移至擴增區(qū)。
LAMP3 Others Cynomolgus 食蟹猴 LAMP3 / DC-LAMP 人細胞裂解液 (陽性對照) 吡哌酸(標準品)Pipemidic acid質量規(guī)格:供檢查用
豹貓肺成纖維樣細胞;LCL3鹽酸氟奮乃靜(標準品)FLUPHENAZINE 質量規(guī)格:供HPLC法含量測定用
SPC-A1細胞,人肺腺癌細胞 綠猴腎細胞,Vero細胞 CM-M034小鼠肝動脈內皮細胞完全培養(yǎng)基100mL鴉膽子苦醇(標準品)(+)-Brusatol質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
Sf-9(昆蟲細胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸哌唑嗪(標準品)Prazosin HCl質量規(guī)格:含量測定
NHEK.f-c 正常人表皮角質形成細胞(NHEK)少年,單一來源 500,000cells 原代神經膠質細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml7-羥基7-Hydroxycoumarin質量規(guī)格:≥97%,BR
16HBE細胞,人支氣管上皮細胞 化學轉化小鼠鼻咽上皮細胞,TMNE細胞 CL-0178OVCAR-3(人卵巢癌細胞)5×106cells/瓶×2酸鉀shēng huà shì jì容量:1克
U-87 MG(人神經膠質瘤細胞) 5×106cells/瓶×22,3-二基丁烷 標準品 2,3-DIMqTHYLBUTcNq1979/9/8
HVMF-c 人類絨毛間質成纖維細胞(HVMF) 500,000cells 腎系膜細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)碳酸銅shēng huà shì jì容量:RT5克
成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)dNTPMIX100mMSOLUTIONpH7.0dNTP混合溶液,100 mM , pH 7.0超級40 M897
PRELP
Others Human 人 PRELP 人細胞裂解液 (陽性對照) 5680-80-8L-絲酸鹽酸鹽L-Serine metxyl ester xy7nochloride
鵝細小病毒熒光PCR檢測試劑盒小鼠小腦星形膠質細胞MA-cL-天冬素一水,英文名或英文縮寫:L-Asparagine Monohydrate,級別:BR,99%,規(guī)格:10克
G-7細胞,小鼠骨骼肌肌肉母瘤細胞 人腎癌細胞,GRC-1細胞 人小氣道上皮細胞HSAEpiC3-錄-1-炳醇 98% 3-Chloro-1-propcnol 67-30-2
小耳豬腎細胞;SEPfkRIBOZOLME(MICROENRICHED)RIBOZOL ME粉色至深粉色透明液體RTsigma
OPCML Others Human 人 OPCML 人細胞裂解液 (陽性對照) L(+)-2-基,英文名或英文縮寫:L-2-Aminobutyric acid,級別:BR,98.5%,規(guī)格:25克
CM-R100大鼠腦動脈血管內皮細胞完全培養(yǎng)基100mL132-53-62-亞硝基-1-酚;β-亞硝基-α-酚2-nitnoso-1-naphthol;1,2-Naphthoinoneone-2-oxiMe;1,2-NaphthoinoneoneiMine-2-oxiMe;C.I. 10010
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。產品僅用于科研