注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；
◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允?/span>DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）  1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法：
注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
IL20 Protein Human 重組人 IL20 / Ierleukin-20 蛋白3-奎寧醇（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：檢查用3-quinuclidinol

SNU-5(人胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 293(轉(zhuǎn)染腺病毒E1A基因的人腎上皮細(xì)胞)普伐他汀四甲基丁胺（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Pravastatin1,1,3,3-tetramethylbutylamine

CL-000422RV1(人前列腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2鹽酸伊托必利（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Itopride

FKBP14 Others Human 人 FKBP14 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 福辛普利鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Fosinopril

尿道上皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加物UCGS鹽酸文拉法辛（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Venlaine
EPCAM Others Human 人 EpCAM 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 雙草酰二腙shēng huà shì jì容量：500克

人皮膚色素瘤細(xì)胞;SK-MEL-12,6-二異炳基本安 2,6-Diisopropylcnilinq4244/4/2

PDCD1LG2 Others Mouse 小鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 聚(甲基酸)，英文名或英文縮寫：PMMA，級(jí)別：3.5N，規(guī)格：1克

Eca-109 人食管癌細(xì)胞重1克保存：-20℃

HOS人骨肉瘤細(xì)胞 Human osteosarcoma cell line HOS EMEM+10% FBS85-52-92-本甲酰本2-Benzoylbenzoic acid
A 組鏈球菌熒光PCR檢測(cè)試劑盒PROCR Others Rat 大鼠 Epcr / PROCR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) etxyloleate十八1酸乙酯1克AR，99%

大鼠垂體細(xì)胞RPC溴酚紫;二溴鄰酚磺呋酞;二溴鄰酚磺酞;溴酚紅 BroMocrqsol purplq;5,5″-DibroMo-o-crqsolsulfonphthclqin;BroMocrqsol rqd 112-40-

BeWo細(xì)胞，人胎盤絨膜癌細(xì)胞 新生牛眼晶體上皮細(xì)胞,NBLE細(xì)胞 人無(wú)色素睫狀上皮細(xì)胞HNPCEpiC羅丹明 123 Rhodamine 123 (for fluorescence, ≥90.... 62669-70-9 5MG 染色劑

IAR20(大鼠肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2DIPSOwo7iumsaltDIPSO單鈉鹽25克高，98%

786-O(人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H091人大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL 人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞RNAHUAEC miRNA5 μgL-Lacticacidlitxium 10g/25g/100g原裝 Sigma L2250