抗體的制備過(guò)程:
1. M Y原:普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為M Y原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有M Y原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. M Y動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量**時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. M Y血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. M Y血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. M Y血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 |
Anti-Uricase抗體 |
規(guī) 格 |
0.1ml/100μg 0.2ml/200μg |
貨號(hào) |
BJ-K95843 |
英文名稱 Anti-Uricase
中文名稱 尿酸酶
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
別 名 Urate oxidase; URICASE; Uox; UOX-2; Uri; Uri2.
交叉反應(yīng) Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 17kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from mouse Neuroglobin
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
對(duì)照/標(biāo)本無(wú)染色 產(chǎn)品僅用于科研
① 確認(rèn)是否忽略了應(yīng)該加的某種試劑,包括一抗、二抗、三抗及底物等。
② 確認(rèn)所有的試劑是否按正確的順序加入,是否孵育了足夠的時(shí)間。
③ 對(duì)照抗體的標(biāo)簽確認(rèn)是否使用了正確的抗體,以及所用的檢測(cè)系統(tǒng)是否和一抗匹配,這一點(diǎn)是非常重要的。比如,如果一抗是兔來(lái)源的抗體,二抗一定要用抗兔的二抗來(lái)匹配;或一抗是小鼠的IgM一抗,二抗必須是山羊/兔抗小鼠的IgM(不是IgG)二抗。
④ 檢查抗體所使用的稀釋度及稀釋溶液。
⑤ 檢查抗體的有效期和保存條件,尤其是標(biāo)記了酶或熒光素的抗體,現(xiàn)在大多數(shù)試劑公司的抗體均要求在4~8℃條件下保存,應(yīng)避免反復(fù)凍融,試劑保存時(shí)一定要避免與揮發(fā)性有機(jī)溶劑同放一室,以免降低抗體的效價(jià)。
⑥ 檢查標(biāo)本的儲(chǔ)存條件,好用已知陽(yáng)性的標(biāo)本來(lái)同時(shí)做陽(yáng)性對(duì)照。
⑦ 檢查色原/底物溶液,簡(jiǎn)單的檢測(cè)方法是將一滴標(biāo)記有酶的抗體加入到制備好的底物溶液中,如果底物發(fā)生預(yù)期的顏色變化,則可排除底物的因素。需要注意的是,有些底物在制成工作液后應(yīng)在一定時(shí)間內(nèi)用完,否則會(huì)失效。
⑧ 檢查沖洗液是否和反應(yīng)試劑匹配,溶液的pH值很重要,與過(guò)氧化物酶底物匹配的溶液中不應(yīng)含有疊氮鈉。
⑨ 檢查復(fù)染劑和封片劑是否和所使用的色原匹配。
弱陽(yáng)性
如果陰性對(duì)照沒(méi)有染色而陽(yáng)性對(duì)照標(biāo)本弱陽(yáng)性,除了考慮上述因素外,還應(yīng)考慮:
① 標(biāo)本的固定方式,不當(dāng)?shù)墓潭ǚ绞交蚬潭〞r(shí)溫度過(guò)高,都會(huì)影響到所檢測(cè)的抗原的數(shù)量和質(zhì)量。
② 不適當(dāng)?shù)目乖迯?fù)方式,由于石蠟切片在制作的過(guò)程中固定劑對(duì)抗原的封閉作用,必須用抗原熱修復(fù)或酶消化或兩種同時(shí)使用的抗原雙暴露法,至于使用哪一種方法,應(yīng)參照**廠家的說(shuō)明,同時(shí)結(jié)合標(biāo)本的具體情況而定。
③ 抗體的稀釋度是否過(guò)高或者孵育的溫度/時(shí)間是否正確。一般試劑**廠家都會(huì)對(duì)試劑給出一定的使用范圍,但是由于使用者的標(biāo)本來(lái)自各種組織,處理過(guò)程也不盡相同,所以應(yīng)參照使用范圍,對(duì)所使用的一抗進(jìn)行梯度測(cè)試,找出佳的使用濃度。
④ 切片上了過(guò)多的沖洗液,當(dāng)抗體加至切片上時(shí),等于人為地對(duì)抗體進(jìn)行了進(jìn)一步的稀釋。
⑤ 孵育時(shí)切片是否放置水平,否則會(huì)導(dǎo)致抗體流失。
如果陰性對(duì)照沒(méi)有反應(yīng),陽(yáng)性對(duì)照反應(yīng)良好,而標(biāo)本弱陽(yáng)性,則可能是由于陽(yáng)性對(duì)照不是同一種咨詢組織、或固定方式不同等原因所致。
Anti-Phospho-SirT1 (Ser27)/FITC 熒光素標(biāo)記0酸化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Bcl-2(抗原) Bcl-2(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
合成酶-1抗體 Anti-NOS-1/bNOS/neuronal NOS/nNOS 0.1ml
5-HTR1B 英文名稱: 5-羥色胺受體1B抗體 0.1ml
FAM62B 英文名稱: 延伸突觸蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-P53(Ser9) 0酸化抑制基因P53抗體 規(guī)格 0.1ml
Bcl-2(抗原) Bcl-2(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Phospho-FLT3 (Tyr969) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠0酸化FMS樣酪氨酸激酶3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ErbB-3/HER3(Epidermal growth factor receptor3) 表皮生長(zhǎng)因子受體3(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
CD57抗體 Anti-CD57 0.1ml
SODD 英文名稱: Bcl2結(jié)合抗凋亡蛋白4抗體 0.2ml
ETL 英文名稱: EGF受體7跨膜結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-GATA6(Tyr271) 0酸化GATA結(jié)合蛋白6抗體 規(guī)格 0.1ml
ErbB-3/HER3(Epidermal growth factor receptor3) 表皮生長(zhǎng)因子受體3(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Uricase抗體兔子白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 6-Aminouracil 873-83-6 中文名:6-氨基尿嘧啶 分子式:C4H5N3O2 度:98.0%
兔子白介素1β(IL-1β)ELISAKit ELISA. 96T/48T 6-Benzyloxypurine 57500-07-9 中文名:6-芐氧基嘌呤 分子式:C12H10N4O
兔子白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 6-Aminouracil 873-83-6 中文名:6-氨基尿嘧啶 分子式:C4H5N3O2
兔子白介素10(IL-10)ELISAKit ELISA. 96T/48T 6-Benzyloxyindole 中文名:6-芐氧基吲哚 分子式:C15H13NO
兔子白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 6-Aminoquinoxaline 中文名:6-氨基喹喔啉 分子式:C8H7N3 度:98.0%