抗體的制備過程:
1. M Y原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為M Y原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有M Y原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. M Y動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量**時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. M Y血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. M Y血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. M Y血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 |
Anti-STEAP1抗體 |
規(guī) 格 |
0.2ml/200μg |
貨號 |
BJ-K95772 |
英文名稱 Anti-STEAP1
中文名稱 前列腺跨膜上皮1抗原抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
別 名 Six transmbrane epithelial antigen of the prostate; MGC19484; PRSS 24; PRSS24; Six transmembrane epithelial antigen of the prostate; STEAP 1; STEAP1.
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Cow, Horse
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 學(xué) 上皮細(xì)胞
蛋白分子量 predicted molecular weight: 40kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human STEAP1 C-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
對照/標(biāo)本無染色 產(chǎn)品僅用于科研
① 確認(rèn)是否忽略了應(yīng)該加的某種試劑,包括一抗、二抗、三抗及底物等。
② 確認(rèn)所有的試劑是否按正確的順序加入,是否孵育了足夠的時(shí)間。
③ 對照抗體的標(biāo)簽確認(rèn)是否使用了正確的抗體,以及所用的檢測系統(tǒng)是否和一抗匹配,這一點(diǎn)是非常重要的。比如,如果一抗是兔來源的抗體,二抗一定要用抗兔的二抗來匹配;或一抗是小鼠的IgM一抗,二抗必須是山羊/兔抗小鼠的IgM(不是IgG)二抗。
④ 檢查抗體所使用的稀釋度及稀釋溶液。
⑤ 檢查抗體的有效期和保存條件,尤其是標(biāo)記了酶或熒光素的抗體,現(xiàn)在大多數(shù)試劑公司的抗體均要求在4~8℃條件下保存,應(yīng)避免反復(fù)凍融,試劑保存時(shí)一定要避免與揮發(fā)性有機(jī)溶劑同放一室,以免降低抗體的效價(jià)。
⑥ 檢查標(biāo)本的儲存條件,好用已知陽性的標(biāo)本來同時(shí)做陽性對照。
⑦ 檢查色原/底物溶液,簡單的檢測方法是將一滴標(biāo)記有酶的抗體加入到制備好的底物溶液中,如果底物發(fā)生預(yù)期的顏色變化,則可排除底物的因素。需要注意的是,有些底物在制成工作液后應(yīng)在一定時(shí)間內(nèi)用完,否則會失效。
⑧ 檢查沖洗液是否和反應(yīng)試劑匹配,溶液的pH值很重要,與過氧化物酶底物匹配的溶液中不應(yīng)含有疊氮鈉。
⑨ 檢查復(fù)染劑和封片劑是否和所使用的色原匹配。
弱陽性
如果陰性對照沒有染色而陽性對照標(biāo)本弱陽性,除了考慮上述因素外,還應(yīng)考慮:
① 標(biāo)本的固定方式,不當(dāng)?shù)墓潭ǚ绞交蚬潭〞r(shí)溫度過高,都會影響到所檢測的抗原的數(shù)量和質(zhì)量。
② 不適當(dāng)?shù)目乖迯?fù)方式,由于石蠟切片在制作的過程中固定劑對抗原的封閉作用,必須用抗原熱修復(fù)或酶消化或兩種同時(shí)使用的抗原雙暴露法,至于使用哪一種方法,應(yīng)參照**廠家的說明,同時(shí)結(jié)合標(biāo)本的具體情況而定。
③ 抗體的稀釋度是否過高或者孵育的溫度/時(shí)間是否正確。一般試劑**廠家都會對試劑給出一定的使用范圍,但是由于使用者的標(biāo)本來自各種組織,處理過程也不盡相同,所以應(yīng)參照使用范圍,對所使用的一抗進(jìn)行梯度測試,找出佳的使用濃度。
④ 切片上了過多的沖洗液,當(dāng)抗體加至切片上時(shí),等于人為地對抗體進(jìn)行了進(jìn)一步的稀釋。
⑤ 孵育時(shí)切片是否放置水平,否則會導(dǎo)致抗體流失。
如果陰性對照沒有反應(yīng),陽性對照反應(yīng)良好,而標(biāo)本弱陽性,則可能是由于陽性對照不是同一種咨詢組織、或固定方式不同等原因所致。
Anti-NKR/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)激肽B受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-NHE1/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記氫通道蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
骨形態(tài)發(fā)生蛋白-7抗體 Anti-BMP-7 0.2ml
Goat Anti-Chicken IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的羊抗雞IgG 0.1ml
Factor VIII B chain 英文名稱: 凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相關(guān)抗原抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh PPARGC1A/PGC1 α 過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1α抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-NHE1/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記氫通道蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Phospho-PLK1 (Thr210)/FITC 熒光素標(biāo)記0酸化絲/蘇氨酸蛋白激酶Plk1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-human IgG Whole serum 羊抗人IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
hypothetical protein抗體 Anti-Hypothetical protein 0.2ml
Rabbit Anti-pig IgG 兔抗豬IgG 1mg
FASTK 英文名稱: Fas活化的絲/蘇酸激酶抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Rb (Ser608) 0酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
Goat Anti-human IgG Whole serum 羊抗人IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
Anti-STEAP1抗體豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 2-Acetylbutyrolactone 中文名:2-乙?;?nèi)酯 分子式:C6H8O3 度:98.0%
豚鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-10 ELISA Kit 2-Acetyl-6-methoxynaphthalene 3900-45-6 中文名:6-甲氧基-2-乙酰萘 分子式:C13H12O2 度:99.0% 關(guān)鍵詞:
豚鼠白介素10(IL10)ELISA試劑盒 ,英文名: IL10 ELISA Kit 2-Acetyl-1H-Isoindole-1,3(2H)-Dione 中文名:2-乙?;?/span>-1H-異吲哚-1,3(2H)-二酮 分子式:C10H7NO3 度:93.0%
豚鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-1 ELISA Kit 2-Acetonaphthone 1993/8/3 中文名:2'-萘乙酮 分子式:C12H10O 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
豚鼠白蛋白(ALB)ELISA試劑盒 ,英文名: ALB ELISA Kit 2-Acetamido-2-deoxy-D-glucose 中文名:N-乙酰氨基葡萄糖 分子式:C8H15NO6 度:99.0%