細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
細(xì)胞名稱 恒河猴肺細(xì)胞；RM-L1
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一雄性獼猴的肺組織。1985年中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件 McCoy＇s 5A Media (Modified with Tricine) 15%NBS
傳代方法 1：2傳代；3-4天一次
傳代情況 P4
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
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產(chǎn)品名稱 |
RM-L1；恒河猴肺細(xì)胞 |
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生長特性 |
貼壁生長 |
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貨號(hào) |
BJ-01X86466 |
細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程：
Peri acid 中文名：周位酸 分子式：C10H9NO3S 度：98.0% 小鼠雌(E)ELISA試劑盒
6-Aminouracil 中文名：6-氨基尿嘧啶 分子式：C4H5N3O2 度：98.0% 小鼠雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒
4-Aminosalicylic
acid 中文名：4-氨基水楊酸 分子式：C7H7NO3 度：98.0% 小鼠雌二醇(E2)ELISA試劑盒
3-Amino-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one 中文名：3-氨基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮 分子式：C9H9N3O 度：98.0% 小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA試劑盒
2-Amino-5-nitrothiazole 中文名：2-氨基-5-硝基噻唑 分子式：C3H3N3O2S 度：98.0% 小鼠雌二醇(E2)ELISAKit5-甲基吲哚(>98%,BR) 5-Methylindole 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
ELISAKitCathAb人組織蛋白酶抗體規(guī)格：48T/96T
5-硝基愈創(chuàng)木酚(植物級(jí))
5-Nitroguaiacol 質(zhì)量規(guī)格：>98%,植物級(jí) 小鼠尼克酰胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶(NNMT)ELISA試劑盒 ，英文名： NNMT ELISA Kit
6--2-萘酚(>98%,BR)
6-Bromo-2-naphthol 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人β羥(β-OHB)ELISA檢測試劑盒HumanBeta-HydroxybyricAcid,β-OHBELISAKit 96T/48T
6-(γ,γ-二甲基烯丙基氨基)嘌呤核苷(植物級(jí))
6-Dimethylallylamino purine riboside 質(zhì)量規(guī)格：>98%,植物級(jí) 大鼠抑胃肽(GIP)試劑盒 Rat gasic inhibitory polypeptide,Gip ELISA
kit
6-甲基(>98%，BR)
6-Methylcoumarin 質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR 英文名稱HumanCCL20ELISAKit人CCL20規(guī)格：96T/48T
7-氨基頭孢烷酸 7-Aminocephalosporanic
acid 質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR 非同位素AP-BCIP/NBT法DNA南方雜交試劑盒5
8-羥基喹哪啶(>98%,BR)
8-Hydroxyquinaldine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR ELISAKitcath-K人組織蛋白酶K規(guī)格：48T/96T
9,10-二蒽(>98%,BR)
9,10-Dibromoanthracene 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒 ，英文名： ADRA1A ELISA Kit
雙酚芴(>98%,BR) 9,9-Bis(4-hydroxyphenyl) fluorine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA檢測試劑盒MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein4,IGFBP-4ELISAkit
96T/48T
酸性藍(lán)29(>50%，Ind
Grade) Acid blue 29 質(zhì)量規(guī)格：>50%，Ind Grade 人肝細(xì)胞生長因子受體(c-MET/HGFR)試劑盒 Human
HGFR ELISA Kit拉西地平（標(biāo)準(zhǔn)品）
Lacidipine 質(zhì)量規(guī)格：含量測定 小鼠前心肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒 ，英文名： Pro-ANP ELISA Kit
拉西地平
Lacidipine 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 小鼠強(qiáng)啡肽(Dyn)ELISA試劑盒 ，英文名： Dyn ELISA Kit
尼林（標(biāo)準(zhǔn)品）
Nicergoline 質(zhì)量規(guī)格：含量測定 小鼠羥甲基戊二酸單酰輔酶A(HMG-CoA)ELISA試劑盒 ，英文名： HMG-CoA ELISA Kit
鹽酸賽洛唑啉（標(biāo)準(zhǔn)品） Xylom
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
RM-L1；恒河猴肺細(xì)胞采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。