細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
細胞名稱 大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞；BOS-5
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一雌性大額牛與婆羅門牛雜交F1代的耳部皮膚組織，2010年由中科院昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1：2傳代；3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
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產(chǎn)品名稱 |
BOS-5；大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞 |
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生長特性 |
貼壁生長 |
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貨號 |
BJ-01X86419 |
細胞STR鑒定服務流程：
2-Acetamido-2-deoxy-D-glucose 中文名：N-乙酰氨基葡萄糖 分子式：C8H15NO6 度：99.0% 小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒
2-Amino-3-chloro-1,4-naphthoquinone 中文名：2-氨基-3-氯-1,4-萘醌 分子式：C10H6ClNO2 度：99.0% 小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISAKit
2-Amino-6-chlorobenzothiazole 中文名：2-氨基-6-氯苯并噻唑 分子式：C7H5ClN2S 度：99.0% 小鼠上腺素(EPI)ELISAKit
Solvent Yellow
3 中文名：溶劑黃 分子式：C14H15N3 度：99.0% 小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISAKit
3-Acetylcoumarin 中文名：3-乙酰基 分子式：C11H8O3 度：99.0% 小鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCAIgG)ELISAKit二苯砜(標準品)
Diphenyl sulfone 質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,>99.5% 大鼠(T)ELISA檢測試劑盒RatTestoterone,TELISAKit 96T/48T
樂果(標準品) Dimethoate 質(zhì)量規(guī)格：分析標準品，99.3% 人端粒酶(TE)試劑盒 Human telomerase,TE ELISA Kit
三氯殺螨醇標準溶液(100μg/ml,u=5%) Dicofol standard solution 質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=5% RatMothersagainstdecapeaplegichomolog1,Smad1ELISAKit大鼠Smad1ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
三氯殺螨醇標準溶液(10μg/ml,u=6%) Dicofol standard solution 質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=6% DNA損傷彗星中性檢測完全試劑盒(銀染)20
烯唑醇(標準品) Diniconazole 質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,99.5% MousePlatelet-DerivedGrowthFactorAB,PDGF-ABELISA試劑盒小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
二乙二醇(標準品) Diethylene glycol 質(zhì)量規(guī)格：分析標準品 小鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒 ，英文名： OVA sIgG ELISA Kit
二乙二醇(Standard for GC,≥99.5%(GC)) Diethylene glycol 質(zhì)量規(guī)格：Standard
for GC,≥99.5%(GC) 大鼠脫氫表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA檢測試劑盒RatDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISAKit
96T/48T
十二醇(標準品) 1-Dodecanol 質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99%(GC) 人端粒保護蛋白1(POT1)試劑盒 Human POT1 ELISA kit
直接藍6(標準品) DIRECT BLUE 6 質(zhì)量規(guī)格：分析標準品 RatMothersagainstdecapeaplegichomolog7,Smad7ELISAKit大鼠Smad7ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
分散橙37(標準品) Disperse Orange 37 質(zhì)量規(guī)格：分析標準品 DNA損傷彗星中性檢測完全試劑盒(熒光染色)20絞股藍皂苷 UV≥98% 20mg ELISAKitf-Hb人游離血紅蛋白規(guī)格：48T/96T
絞股藍皂苷A HPLC≥98% 20mg
ELISAKitFibrin人血纖蛋白規(guī)格：48T/96T
絞股藍皂苷XLIX HPLC≥98% 10mg
ELISAKitfibromodulin人纖調(diào)蛋白規(guī)格：48T/96T
介芬胺 HPLC≥98% 20mg
ELISAKitFK506人他克莫司規(guī)格：48T/96T
金剛烷 HPLC≥98% 20mg
ELISAKitFN人纖連蛋白規(guī)格：48T/96T
金合歡素
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞產(chǎn)品僅用于科研
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
BOS-5；大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。