操作步驟：產(chǎn)品僅用于科研

1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預(yù)冷

2：離心收集對數(shù)生長期的細(xì)胞（貼壁細(xì)胞消化下來離心，懸浮細(xì)胞直接離心，轉(zhuǎn)速1200rpm或250g，時間3min）

3：用配制好的凍存液重懸細(xì)胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標(biāo)記

4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過夜（24h）

5：凍存管從凍存盒取出，轉(zhuǎn)移至液氮長期保存

產(chǎn)品名稱	生長特性	貨號
BFR-S3；大額牛皮膚細(xì)胞	貼壁生長	BJ-01X86406

細(xì)胞名稱 大額牛皮膚細(xì)胞；BFR-S3

形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣

生長特性 貼壁生長

特征特性  該細(xì)胞系來源于一雄性新生大額牛的皮膚組織。2000年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。

培養(yǎng)條件  M-199: with Earle＇s Balanced Salts Solution (EBSS)  15%NBS

傳代方法  1：2傳代；3-4天一次

傳代情況 P2

凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

處理辦法：

① 脫落的細(xì)胞進(jìn)行離心收集，并在離心管中消化。

② 仍然貼壁的細(xì)胞，按照常規(guī)方法加入胰酶或其他解離劑消化。

③ 再將消化好的脫落細(xì)胞和貼壁細(xì)胞混合，按比例接種到新的培養(yǎng)器皿中。

放入培養(yǎng)箱靜置2-4小時，若4小時后仍然沒有伸展，延長靜置時間。注意，過夜靜置時，需倒出部分培養(yǎng)基，留5-10mL在瓶中，瓶蓋擰松透氣，保持氣體交換（L15培養(yǎng)體系除外）。

操作步驟

1：從冰箱拿出無血清非程序凍存液，待用

2：離心收集對數(shù)生長期的細(xì)胞（貼壁細(xì)胞消化下來離心，懸浮細(xì)胞直接離心，轉(zhuǎn)速1200rpm或250g，時間3min）

3：棄上清，加入適量無血清非程序凍存液，重懸細(xì)胞

4：按照1~1.5mL/管的量分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標(biāo)記

5：將凍存管直接移入-80℃冰箱中，24h后轉(zhuǎn)移至液氮長期保存

細(xì)胞凍存液操作示意圖：

Formestane  中文名：福美司坦  分子式：C19H26O3  度：98.0%  小鼠IgG(mouse IgG)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

4-Chlorotestosterone acetate  中文名：醋酸氯  分子式：C21H29ClO3  度：98.0%  小鼠IgM(mouse IgM)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Estra-4,9-diene-3,17-dione  中文名：甲基雙烯雙酮  分子式：C18H22O2  度：98.0%  小鼠白介素-1a(mouse IL-1a)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Methoxydienone  中文名：沃氏物  分子式：C20H28O2  度：98.0%  小鼠白介素-1b(mouse IL-1b)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  

Methasterone  中文名：甲基屈他雄酮  分子式：C21H34O2  度：98.0%  小鼠IgE   英文名稱：    immunoglobulin E   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IgE1,2,3,4-四氫萘(THN)(Standard for GC, ≥99.5% (GC))  1,2,3,4-Tetrahydronaphthalene  質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC, ≥99.5% (GC) ELISAKitLipase人脂肪酶規(guī)格：48T/96T

三乙酯(TEP)(Standard for GC,>99.7%(GC))  Triethyl phosphate  質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99.7%(GC) 小鼠0脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒 ，英文名： PL-A2 ELISA Kit

十三烷(Standard for GC,>99%(GC))  Tridecane  質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99%(GC) 大鼠雌二醇受體(ER)ELISA檢測試劑盒ratEsadiolreceptor,ERELISAKit 96T/48T

十四醇(Standard for GC, ≥99.5% (GC))  1-Tetradecanol  質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC, ≥99.5% (GC) 人調(diào)寧蛋白-1(CNN1)試劑盒 Human Calponin-1,CNN1 ELISA Kit

十一烷(standard for GC,≥99.5%(GC))  Undecane  質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥99.5%(GC) RatN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISAKit大鼠N-乙?；?span lang="EN-US">-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

十一酸(Standard for GC,≥99.0%(GC))  Undecanoic acid  質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.0%(GC) D-蘋果酸待測樣品處理試劑盒20

甲基壬基甲酮(Standard for GC,≥99.5%(GC))  2-Undecanone  質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC) MouseproteinkinaseB,PKBELISA試劑盒小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品)  cis-4,7,10,13,16,19-Docosahexaenoic acid methyl ester  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠0脂酶A2(PL-A2)ELISA 試劑盒

順式-5,8,11,14,17-二十碳五烯酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  cis-5,8,11,14,17-Eicosapentaenoic acid  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 The rat cellar protein Caveolin1 (Cav-1) ELISA Kit 大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA試劑盒

Celite 硅藻土 545(助濾劑,碳酸鈉處理,通量煅燒)  Celite 545  質(zhì)量規(guī)格：助濾劑,碳酸鈉處理,通量煅燒 HumanElastinELISAKit 人彈性蛋白(Elastin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝甲基立枯磷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%)  Tolclofos-methyl  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98% 人B細(xì)胞受體(BCR)ELISA檢測試劑盒HumanBcellreceptor,BCRELISAKit 96T/48T

殺蟲單(標(biāo)準(zhǔn)品)  Thiosultap di  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 人cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)ELISA檢測試劑盒HumanCyclicAMPresponseelemebindingprotein,CREBELISAKit 96T/48T

綠草定(標(biāo)準(zhǔn)品)  Triclo

BFR-S3；大額牛皮膚細(xì)胞細(xì)胞復(fù)蘇步驟：

1：水浴鍋預(yù)熱至37℃?zhèn)溆?

2：準(zhǔn)備15mL離心管，并向其中加入適量培養(yǎng)基待用

3：將細(xì)胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出，放入PE手套中，迅速投入水浴鍋

4：用力搖晃凍存管，使其在1分鐘內(nèi)融化

5：用紙巾擦拭水漬，轉(zhuǎn)移至生物**柜。用移液槍吸取細(xì)胞懸液，緩慢滴加到步驟2中準(zhǔn)備好的離心管

6：1200rpm離心3分鐘

7：棄上清，用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，接種至新的無菌培養(yǎng)器皿中